基于RAPD技术分析La3+对小麦根尖DNA稳定性的影响(2)

RAPD技术是基于PCR原理,以一系列不同的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链(一般长度为10个碱基)作为引物,对所要研究的基因组DNA单引物扩增。扩增的产物用


RAPD技术是基于PCR原理,以一系列不同的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链(一般长度为10个碱基)作为引物,对所要研究的基因组DNA单引物扩增。扩增的产物用聚丙烯酰胺或者琼脂糖凝胶电泳进行分离,用溴化乙锭(EB)进行染色,在紫外透视仪上检测扩增产物的DNA片段的多态性。该多态性可以反映基因组相对应区域的DNA多态性[12]。经过不同处理以后的生物的基因组DNA不相同,通过RAPD扩增以后产生的DNA条带也就会不同,因此可以通过分析产生条带的多样性来检测处理以后的生物的基因组DNA的变化。

1材料与方法

1.1材料及药品

周口农科院提供周-10品系小麦种子;LaCl3(10mM)母液;DNA提取试剂盒(康为世纪生物公司)。

1.2实验方法

1.2.1小麦种子萌发及生根处理

选取颗粒饱满、大小相近的小麦种子用蒸馏水浸泡吸涨2小时后,放在铺有用蒸馏水润湿的滤纸的直径10厘米的培养皿中,于25℃恒温培养箱中避光培养。挑选萌发露白1毫米左右的种子分别放入铺有用蒸馏水和0.5mM、1.0mM、1.5mM、2.0mM浓度LaCl3溶液浸湿的滤纸上22℃避光培养24小时。

1.2.2根长统计

分别测量CK、0.5mM、1.0mM、1.5mM、2.0mM组的小麦主根长,详实记录。并用graph5软件作图并分析差异。