摘要：探究重金属胁迫下，拟南芥RBOH基因对转基因与野生型拟南芥生长的影响，首先培育出转基因和野生型拟南芥幼苗，待其生长到合适的状态 ，以铜离子为重金属代表，对生长状态相似的转基因与野生型拟南芥进行铜离子胁迫处理，通过测定拟南芥过氧化氢酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、细胞内丙二醛(MDA)含量、过氧化物酶(POD)活性及脯氨酸(Pro.)含量等，探索重金属对拟南芥RBOH基因抗逆性的影响。通过实验测出野生型与转基因型拟南芥实验数据以及对比，可发现处于重金属胁迫下转基因拟南芥生长情况较好，RBOH基因提高了拟南芥的抗逆性。

关键词：拟南芥；重金属； Cu2+胁迫

Comparison the Impact of Heavy Metal Stress on the Growth of Transgenic and Wild-type Arabidopsis

Abstract : Explore the effect of heavy metal stress, Arabidopsis RBOH gene on the growth of transgenic and wild type Arabidopsis, first produced by transgenic and wild-type Arabidopsis seedlings, the growth to the appropriate state, with copper metal, transgenic and wild type Arabidopsis growth state of similar copper ion stress, through the determination of Arabidopsis catalase (CAT) activity, superoxide dismutase (SOD) activity, malondialdehyde (MDA) content, peroxidase (POD) activity and proline (Pro.) content, explore the influence on heavy metal resistance of Arabidopsis RBOH gene. The experimental data of wild-type and transgenic Arabidopsis and the comparison of measured by experiments, can be found in the growth of transgenic Arabidopsis plants under heavy metal stress better, improve the resistance of Arabidopsis RBOH gene.

Key words: Arabidopsis Thaliana; Heavy metals; Cu2 + stress

目    录

摘  要 1

引  言 1

1实验材料与方法 2

1.1供试材料和仪器 2

1.1.1培养基 2

1.2拟南芥种子处理与培养 3

1.3盆栽生长和胁迫处理 3

1.4生理生化指标测定 3

1.4.1拟南芥过氧化氢酶(CAT)活性的测定 3

1.4.2拟南芥过氧化物酶活性的测定 4

1.4.3拟南芥超氧化物歧化酶活力的测定 4

1.4.4拟南芥细胞内丙二醛含量的测定 5

1.4.5拟南芥植物体内脯氨酸含量的测定 5

2结果分析与讨论 6

2.1重金属Cu胁迫对转基因型与野生型拟南芥过氧化氢酶活性影响 6

2.2重金属Cu胁迫对转基因型与野生型拟南芥过氧化物酶活力的影响 7

2.3重金属Cu胁迫对转基因型与野生型拟南芥超氧化物歧化酶活力的影响 8

2.4重金属Cu胁迫对转基因与野生型拟南芥细胞丙二醛含量的影响 9

2.5重金属Cu胁迫对转基因与野生型拟南芥脯氨酸含量的影响 10

3结论 10

参考文献 12

致   谢 14

比较重金属胁迫对转基因与野生型拟南芥生长的影响

引言

当代普遍的采矿业、重工业以及现代农业快速发展以及大规模化学农药和肥料的施用等，土壤、湖泊等生态系统造成巨大破坏，也直接给人们的日常生活和工作带来很大的危害。重金属造成的污染破坏是巨大的，因为通过工业废水排放，废气排放中的重金属可以进入生态系统中，通过微生物以及低等植物形成的食物链食物链最终在人体内积累，给人体造成巨大的伤害。植物生长过程需要微量的Cu2+，过量的Cu2+会给植物造成巨大的伤害。

拟南芥又名阿拉伯芥、鼠耳芥，作为一种拟南芥属草本植物在我国许多地区广泛分布。拟南芥植株小，生长周期短，结实率高，基因组小，是典型的自交繁殖植物等特点，成为人们实验的模式植物，对于开展遗传分析、基因克隆和功能研究意义重大。重金属Cu进入土壤后，拟南芥吸收土壤中的重金属Cu，对拟南芥植株造成伤害，其形态结构以及体内各项生理指标发生变化。本实验以模式转基因（RBOH）植物拟南芥为实验对象，参考相关文献质料[4]，以铜Cu为重金属代表胁迫处理，比较在单一重金属胁迫下，转基因与野生型拟南芥植物生长的影响。