摘要：目的：通过固体发酵技术，筛选产纤维素酶的芽孢杆菌在不同温度下最适的固体培养基。方法：利用“采样—活化—接种—培养—测酶活”的方法筛选最适的固体培养基。结果：通过最后测定酶活结果可知在37℃下，玉米粉与小麦麸皮的比例为1:1的培养基比其它两种培养基测定的酶活最大，而在50℃下，玉米粉与小麦麸皮的比例为3:7的酶活最大。结论：在37℃时采用小麦麸皮和玉米粉比例为1:1的培养基为最适培养基，在50℃时采用小麦麸皮和玉米粉比例为3:7的培养基为最适培养基。

关键词:固体发酵；芽孢杆菌；纤维素酶

Production of Cellulase by Microbial Solid Fermentation

Abstract: Objective: to screen solid fermentation medium for cellulase production by solid fermentation technology. Methods: using the method of sampling - - - Training - activated vaccination OD value "screening the most suitable medium of solid. Results: after the final determination of OD value shows in 37 DEG C, the proportion of corn flour and wheat bran for cultivation of 1:1 Gibeah the other two medium determination of OD value was the highest, and in 50 DEG C, corn flour and wheat bran proportion for 3:7 OD value was the highest. Conclusion: at 37 DEG C by wheat bran and corn powder ratio of 1:1 medium for the optimum culture medium, in 50 DEG C when the wheat bran and corn powder ratio of 3:7 medium was the optimum medium.

Key words: Solid fermentation; Bacillus; Cellulase

目    录

摘  要 1

引言 2

1. 材料与方法 2

1.1 实验材料 2

1.1.1 实验试材 2

1.1.2 主要培养基 2

1.1.3 试剂 2

1.2 主要仪器与设备 3

1.3 主要实验方法 3

1.3.1 芽孢杆菌的筛选 4

1.3.1.1 芽孢的富集 4

1.3.1.2 梯度稀释菌悬液 4

1.3.1.3 涂布平板与划线接种 4

1.3.2 菌种的活化 4

1.3.4 接种到固体培养基 5

1.3.5利用DNS法测定还原糖含量 5

1.3.5.1 标准曲线的制备 5

1.3.5.2 酶活的测定 6

1.4 酶活的测定方法 6

1.4.1 酶活的测定原理 6

1.4.2 计算的方法 6

2. 结果 7

2.1 分离产纤维素酶的芽孢杆菌 7

2.1.1 菌落的鉴定 7

2.2 葡萄糖标准曲线的制备 8

2.3 三种培养基中的酶活结果 9

2.4 不同温度下的酶活分析 10

2.4.1 37℃培养条件下酶活结果分析 10

2.4.2 50℃培养条件下酶活结果分析 11

2.4.3 其他稀释倍数酶活分析 12

3. 结论 13

参考文献 14

致谢 16

微生物固体发酵生产纤维素酶

  引言

纤维素酶不是单一的一种酶，是好多种酶系在一块起协同作用，是把纤维素分解成为葡萄糖的一类酶的总称。纤维素在地球上的资源比较富足，如果通过降解，就可以转化为很多有用的东西为我们人类所用，这对于解决全球食物难题和能源问题有非常大的意义。随着科技的发展，我们可以利用的资源越来越少，而环境的污染日益加重，寻找减少环境污染的有效途径显得越来越紧迫。由于纤维素的生产成本过高，因此，寻找高产纤维素酶的途径，提高纤维素酶的活力对一些能源的利用具有深远的意义。此次实验就是利用微生物发酵产酶的功能，通过固体培养基发酵生产纤维素酶。

1. 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验试材

芽孢杆菌：从土壤中筛选的芽孢杆菌SC1。

1.1.2 主要培养基

活化芽孢杆菌用的LB培养基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，pH 7.4，水1000 mL；

产酶培养基1号：小麦麸皮5g，玉米粉5g，羧甲基纤维素钠0.2g，硫酸铵0.1g，磷酸氢二钾0.005g，尿素0.2g，碳酸钙0.05g；

产酶培养基2号：小麦麸皮3g，玉米粉7g，硫酸铵0.05g，磷酸氢二钾0.01g，尿素0.1g，碳酸钙0.07g，硫酸镁0.02g；