产酶培养基3号：小麦麸皮7g，玉米粉3g，羧甲基纤维素钠0.1g，硫酸铵0.15g，磷酸氢二钾0.02g，尿素0.05g，碳酸钙0.02g，硫酸镁0.01g。

筛选培养基：羧甲基纤维素钠20g，磷酸氢二钠2.5g，磷酸二氢钾1.5g，蛋白胨2.5g，酵母膏0.5g，琼脂20g，水1000mL，pH：7.0~7.2。

上述所有培养基的灭菌条件统一为：121 ℃，0.1 MPa，15 min。

1.1.3 试剂

（1）DNS试剂：准确称取3，5-二硝基水杨酸10 g，溶于600 mL水中，然后加入氢氧化钠10 g，在水浴中用玻璃棒搅拌溶解，水浴温度是50 ℃，然后再按顺序加入酒石酸钾钠200 g，苯酚2 g，最后加入无水亚硫酸钠5 g，等到完全溶后，放置恢复到室温。然后加入蒸馏水，接着用用1000 mL的容量瓶定容，最后又经过滤。最后把它保存在棕色试剂瓶中，放在暗处1天后再使用。

（2）葡萄糖标准贮备液：称取葡萄糖1 g后加入蒸馏水，用玻璃棒充分搅拌溶解，然后用100 mL的容量瓶定容。

（3）羧甲基纤维素钠溶液（CMC-Na）：用天平准确称取羧甲基纤维素钠0.80g，然后用量筒量取乙酸—乙酸钠缓冲液90mL，然后倒入烧杯中，在磁力搅拌器上将称取的羧甲基纤维素钠缓慢的加入烧杯中，目的是为了是让羧甲基纤维素钠充分溶解。最后定容是用乙酸—乙酸钠缓冲液，定容到100mL。将配好的羧甲基纤维素钠溶液在4度冰箱避光保存，有效期为3天。

（4）pH为5.0的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液：准确称取磷酸氢二钠7.164 g，用100mL的容量瓶加入蒸馏水定容，即为0.2 mol/L的A液。准确称取柠檬酸2.101 g，加水定容至100 mL，即为0.1 mol/L的B液。然后取A液51.5 mL，B液48.5 mL混合，即为所需缓冲液。

1.2 主要仪器与设备

离心机                               湖南湘仪实验室仪器开发有限公司生产 立体压力蒸汽灭菌锅                   上海三申医疗器械有限公司生产        磁力加热搅拌器                       常州普天仪器制造有限公司生产DHG-2150B电热鼓风干燥箱             郑州生元仪器有限公司生产      PL601-L电子天平                      梅特勒-托利多仪器有限公司生产   UV752紫外可见分光光度计             上海佑科仪器仪表有限公司生产       水浴恒温振荡器                       金坛市精达仪器制造有限公司生产  HWS24型电热恒温水浴锅               上海一恒科学仪器有限公司生产      LRH系列生化培养箱                   上海一恒科技有限公司生产        GL88B型漩涡混合器                   海门市其林贝尔仪器制造有限公司生产 洁净工作台                           苏净集团苏州安泰空气技术有限公司产。

1.3 主要实验方法

1.3.1 芽孢杆菌的筛选

1.3.1.1 芽孢的富集

  土壤样品：一般采集的土壤是距离地表10cm左右，并且周围有花草的地方；培养基：牛肉膏蛋白胨培养基；先称取泥土10g，然后放到烧杯里面，然后往烧杯里面加90mL的无菌水，然后充分震荡摇晃，这样持续10min后就得到土壤的悬液了。在水温为80℃的水浴锅中加热10分钟，让菌体在高温中死亡，最后目的是使得芽孢得到富集。

1.3.1.2 梯度稀释菌悬液