酯化酶复合菌剂的制备工艺条件研究(2)

1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌株来源 菌种:生命科学与农学学院发酵工程实验室保藏的从宋河大曲分离出的芽孢菌、酵母菌、霉菌。 1.1.2主要培养基 霉菌种


1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株来源

菌种:生命科学与农学学院发酵工程实验室保藏的从宋河大曲分离出的芽孢菌、酵母菌、霉菌。

1.1.2主要培养基

霉菌种子液培养基[11]:氯化钠60g,蔗糖30g,硝酸钠20g,磷酸二氢钾1.0g,氯化钾0.5g硫酸镁0.5g,硫酸亚铁0.01g,20g琼脂粉,水1000mL,pH值自然;

酵母菌产酯化酶筛选培养基[12]:马铃薯200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,琼脂粉20g,三丁酸甘油脂4mL,水1000mL,pH自然;

霉菌产酯化酶筛选培养基[13]:氯化钠60g,硝酸钠20g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾1.0g,蔗糖30g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,三丁酸甘油酯4mL,琼脂粉20g,水1000mL,pH值自然;

芽孢菌酯化酶筛选培养基[13]:酵母膏0.7g,蛋白胨1g,硫酸铵0.2g,葡萄糖1g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁0.2g,琼脂粉20g,三丁酸甘油酯4mL,水1000mL,pH值7.2-7.4;

发酵培养基[14-15]:营养液和麸皮培养基的比例为5:1,其中营养液(g/L)配方为硫酸铵1.5g,磷酸二氢钾1.5g,硫酸镁0.3g,氯化钙0.3g;麸皮培养基:水和麸皮的比例为1:1(质量比,g/g)。

PDA培养基[10]:200g马铃薯,切成均匀小块,放入1000mL水中,煮沸加热25min,纱布过滤,取滤液,加50g葡萄糖,补足水到1000mL。

基础培养基[10]:氯化钠0.5%,蛋白胨1.0%,牛肉膏0.3%,琼脂2.0%,pH7.0-7.2。

查氏培养基[11]:葡萄糖30g,磷酸氢二钾1.0g,酵母提取物1g,硫酸镁0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,琼脂20g,pH5.6,定容至1000mL。

所有培养基灭菌条件:0.1MPa,121℃,30min。