摘  要：该实验通过对农杆菌介导的CTAPi-YFP载体转化陆地棉新技术进行实验研究，检验实验室新开发的活体伤口转化技术的适用性。实验包括种子播种萌发培养、载体扩增和转化农杆菌、转化棉花及阳性转化菌株或植株的鉴定等内容。实验证明新转化方法简单方便、高效快捷。

关键词：棉花;转基因;活体伤口转化技术

Experimental Study on Transformation of Upland Cotton with CTAPi-YFP Vector

Abstract: The experiment studys a new technology that transforms the CTAPi - YFP carrier of agrobacterium mediated into upland cotton, in order to test the applicability of the new technology of living wound transformation developed by the laboratory. The experiment includes seeds sowing germination, vector amplification and transformed agrobacterium, transformed cotton and positive transformed strains or the identification of plants. Experiments show that the new method is simple and convenient and efficient.

Key words: Cotton ; Transgene; Living wound transformation technology

目    录

摘  要 1

关键词 1

引言 1

1. 材料和方法 3

1.1 实验材料 3

1.1.1 植物材料 3

1.1.2 实验基本试剂配方 3

1.2 实验仪器 4

1.3 实验方法 4

1.3.1 陆地棉种子萌发 4

1.3.2 大肠杆菌转化 5

1.3.3 PCR鉴定方法步骤 5

1.3.4 质粒提取方法步骤 6

1.3.5 农杆菌感受态转化 7

1.3.6 摇农杆菌 7

1.3.7 转化和培养棉花幼苗 7

1.3.8 提取DNA 8

1.3.9 PCR鉴定 8

2. 结果和分析 8

2.1 陆地棉种植情况 8

2.2 大肠杆菌提取质粒PCR鉴定结果 8

2.3 农杆菌菌液PCR鉴定结果 9

2.4 农杆菌转化陆地棉幼苗结果 10

2.5 转化苗DNA的PCR鉴定结果 10

3. 讨论和结论 10

参考文献 12

致谢 14

CTAPi-YFP载体转化陆地棉的实验研究

 摘  要：该实验通过对农杆菌介导的CTAPi-YFP载体转化陆地棉新技术进行实验研究，检验实验室新开发的活体伤口转化技术的适用性。实验包括种子播种萌发培养、载体扩增和转化农杆菌、转化棉花及阳性转化菌株或植株的鉴定等内容。实验证明新转化方法简单方便、高效快捷。

关键词：棉花;转基因;活体伤口转化技术

Experimental Study on Transformation of Upland Cotton with CTAPi-YFP Vector

Abstract: The experiment studys a new technology that transforms the CTAPi - YFP carrier of agrobacterium mediated into upland cotton, in order to test the applicability of the new technology of living wound transformation developed by the laboratory. The experiment includes seeds sowing germination, vector amplification and transformed agrobacterium, transformed cotton and positive transformed strains or the identification of plants. Experiments show that the new method is simple and convenient and efficient.

Key words: Cotton ; Transgene; Living wound transformation technology

引言

转基因育种已经成为世界范围内农作物增产、品质改良等重要因素。根据统计，已有35科120种植物在全世界转基因成功。转基因作物的种植面积从1996年的170万公顷迅速上升到2016年的1851万公顷，达到110倍的增长[1]。在26个国家，1851万公顷转基因作物种植，其中19个是发展中国家，7个是发达国家。发展中国家的种植面积占世界转基因作物种植面积（1851万公顷）的54%，而发达国家的种植面积占46%[2]。世界上最大的转基因作物种植国仍然是美国，面积为7290万公顷，占世界种植面积的39.4%。其他10个国度分别是巴西、阿根廷、加拿大、印度、巴拉圭、巴基斯坦、中国、南非和乌拉圭[3]。

跟踪转基因作物的非营利生物技术产业团体国际农业生物技术应用服务组织（ISAAA）的报告指出，转基因作物种植面积占到91%的五大国家中，其中3个在发展中国家(巴西、阿根廷和印度)，2个在发达国家(美国和加拿大)。全球有11种转基因农作物，包括玉米、大豆、棉花、油菜、甜菜、苜蓿、木瓜、南瓜、马铃薯、杨树、茄子[4]。2016年四大主要转基因作物大豆、玉米、棉花和油菜的种植面积下落[5]，转基因大豆的利用率达到78%、转基因棉花的利用率为64%、转基因玉米的利用率为26%，转基因油菜的利用率为24%。