3.2不同外植体对愈伤组织及不定芽诱导的影响 14

3.3不同激素配比对愈伤组织及不定芽分化、增殖的影响 15

3.4继代代数对愈伤组织及不定芽分化、增殖的影响 15

3.5不同浓度激素对生根壮苗的影响 15

参考文献 16

致谢 18

番茄组织培养技术研究

引言

番茄(Solanumlycopersicum)是茄科番茄属的一年生或多年生植物，因其丰富的营养价值，独特的风味，深受广大群众喜爱，这也使其成为全世界普遍栽培的果蔬之一[1]。番茄作为一种蔬菜，已被科学家证明含有多种维生素和营养成分，如番茄含有丰富的维生素C和维生素A以及叶酸、钾等营养元素。番茄还具有很多其他方面的功能，如番茄含有大量的抗氧化剂，它能够防止自由基对皮肤的破坏，具有明显的美容抗皱的效果；番茄红素有祛斑、祛色素的功效[2]，同时它还能抗衰老、降低心血管疾病的危险性和防癌抗癌。

番茄的组织培养在优良品种快繁、转基因[3~5]、突变体保存等方面的研究中发挥着重要作用，因此番茄的组织培养技术是进行相关研究的基础。

在番茄外植体的选择中，可以用其下胚轴、子叶、叶、茎和花药等进行离体培养并获得再生植株。李铁松等[6]认为下胚轴最适合建立番茄植株再生体系；王水琦等[7]研究表明子叶形成愈伤组织和不定芽的能力高于下胚轴；Van.D.T等[8]研究表明叶片易于形成愈伤组织但不易形成不定芽；Brasileiro等[9]认为花药适合诱导愈伤组织而不适合形成不定芽。

在对番茄种子使用不同的灭菌方法进行灭菌的实验中，不同的研究者得出的结论也不同。孙同虎等[10]研究表明，升汞处理的种子不易萌发，而次氯酸钠处理的种子6天左右萌发，但有一定污染。吴志刚等[11]表明，10%NaClO溶液与土温共同处理30min灭菌效果最好。曲雪艳等[12]研究表明，用10%NaClO对番茄种子处理20min效果最好，而且种子萌发率最高。

另外，外植体苗龄、横切次数、接种密度、正反面放置等因素也会影响到番茄的组织培养效果。银利辉等[13]研究表明子叶苗龄在8~9天时不定芽再生效果最好；任春梅等[14]研究表明子叶横切成3段时不定芽形成效果好；黄刚等[15]研究指出子叶接种密度在5-7个/瓶时，有利于形成不定芽；师校欣[16]研究表明子叶正面放置培养基中再生效果更好。

在番茄组织培养研究中，由于不同激素的组合及比例不同，往往会有不同的实验效果。于明礼等[17]以中蔬6号为研究对象，在IAA与ZT两种激素组合下番茄植株的出芽率、正常芽率都明显高于6-BA与IAA组合。关正村等[18]认为6-BA与IAA组合不利于诱导不定芽的分化。陈丽萍等[19]研究表明ZT、6-BA、KT三种激素中，ZT对不定芽诱导效果最好，其次是6-BA，KT诱导效果最差。陈火英等[20]发现番茄的内源生长素浓度较高，是否添加生长素对不定芽发根影响不大。高南等[21]研究表明下胚轴在ZT与IAA组合下形成愈伤组织与不定芽的效果好。

本实验从灭菌剂的选择、外植体的选择、不同激素处理等方面研究了番茄的组织培养技术，为今后进一步的研究奠定良好的基础。

1.材料与方法

1.1实验材料

实验选用的“瑞星”番茄品种购于周口农科院。

1.2试验方法

1.2.1种子的表面灭菌与接种

将番茄种子先用自来水清洗5min，在超净工作台上用75%酒精浸泡30s，然后采用以下几种消毒方法对种子进行消毒。

处理1：10%NaClO溶液消毒30min。

处理2：先用10%NaClO溶液消毒15min再用0.1%HgCl2溶液消毒3min。

处理3：先用10%NaClO溶液消毒15min再用0.1%HgCl2溶液消毒5min。

处理4：0.1%HgCl2溶液消毒3min。

处理5：0.1%HgCl2溶液消毒5min。