大豆（Glycine max （L.）Merr）是世界上重要的可食用蛋白和工业原料来源，随着社会经济发展和可耕作土地面积的减少，我国大豆产量逐渐不能满足人们的需求。1963年我国从大豆出口国转变成了大豆进口国，并且对大豆的需求还在逐年增加。在这种形势压迫下，急需提高我国大豆的产量和质量，但是各种非生物胁迫成为改变这种现状的重要限制因子。因此，缓解或降低各种非生物胁迫对大豆生长造成的伤害具有重要意义。

研究表明，木霉菌能够诱导植物增强抵抗非生物胁迫（盐、旱等）的能力，帮助降低甚至清除植物体内的损伤，但相比较于微生物在植物病虫害防治方面的研究而言，微生物应用于非生物胁迫的成果较少。本研究中，我们首先用木霉T-aloe对大豆进行诱导后进行了盐胁迫处理，预对这一过程中的大豆响应的抗盐活性物质进行研究，以揭示木霉诱导下大豆耐盐性增强的机制。

1. 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 大豆、木霉菌株、试剂

大豆为中黄20，购于周口市种子公司，木霉菌株T-aloe由生命科学与农学学院微生物实验室保存，其它所用试剂均为国产分析纯。

1.1.2 培养基

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA固体培养基）：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蒸馏水定容至1L。

马铃薯葡萄糖培养基（PD液体培养基）：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、蒸馏水定容至1L。

1.1.3 主要仪器

单人净化工作台（SW-CJ-IG）: 苏州净化设备有限公司；

722S可见分光光度计（C1005200）: 上海菁华科技仪器有限公司；

立式压力蒸汽灭菌器（LD2X-50KB）：上海申安医疗器械厂；

海尔双开门冰箱（BCD-215Kcm）: 青岛海尔股份有限公司；

电子天平（AR423CN）: 奥豪斯仪器有限公司；

电热恒温水浴锅（HH-S4）：郑州生元仪器有限公司；

土壤养分速测仪（TPY-11）：浙江托普仪器有限公司；

台式高速冷冻离心机（TGL-16）：湖南湘仪实验仪器开发有限公司；

恒温培养摇床（THZ-300）：上海一恒科学仪器有限公司；

紫外投射反射分析仪（ZF-A）：上海康华生化仪器制造有限公司；

电泳仪（DYY-6C）：北京市六一仪器厂；

移液枪、接种针、培养皿、研钵。

1.2 方法

1.2.1 木霉菌株T-aloe的活化

将实验室保存的木霉菌株T-aloe菌种接种到PDA固体培养基上，标明菌种、培养基种类、接种日期，并将接好的培养基放于28℃暗培养至培养基上长满菌丝或孢子，前两天正放置，然后倒过来放置培养，以防止蒸发的水分影响菌株的培养，菌株活化3d。

1.2.2 木霉菌株培养代谢物的准备

首先配置PD液体培养基，在洁净工作台中将活化好的菌株T-aloe接种到液体培养基中，在28℃、220rpm恒温摇床培养培养。大约5天左右，过滤除去菌丝，收集到的滤液即为木霉代谢物，OD600≈1.0。