杜鹃属基因组DNA提取方法的优化(3)

1.5 DNA提取方法的优化 以杜鹃叶片称量的大小,水浴的时间为因素进行单因素实验设计。对所提取的DNA样品采用琼脂糖凝胶电泳,并利用凝胶自动成像系统


1.5 DNA提取方法的优化

以杜鹃叶片称量的大小,水浴的时间为因素进行单因素实验设计。对所提取的DNA样品采用琼脂糖凝胶电泳,并利用凝胶自动成像系统进行扫描检测。制0.8%的琼脂糖凝胶,先配1000ml的1XTAE电泳缓冲液(980蒸馏水+20ml 50XTAE),将适量1XTAE倒入电泳槽中 ;称取0.32g琼脂粉放入三角瓶中,加入40ml 1XTAE,放入微波炉中加热,先预热30S,轻轻摇晃,继续加热至沸腾,煮至透明,使其完全溶解,溶解完全后,冷却至60℃左右,倒入烧杯中,加3.2ul核酸染料,将其慢慢倒入胶槽中,冷却使其充分凝固,若有气泡,将气泡拨到一边。然后取2ulBuffer于RCR板上点一个点,再用移液枪取3ul已溶解的DNA模板点在样点上;最后将凝固的琼脂放入电泳槽中,将PCR板上的样品点到电泳凝胶孔道上,取3ulDNA Marker于电泳凝胶孔道的中央,电泳30min,电泳电压为120V。电泳结束后,将琼脂块放到凝胶自动成像系统中进行成像,以此来检测DNA样品的大小及完整性,有无降解,是否含有RNA,并用DNA Marker作为对照。