本实验以hepg2肝癌细胞为模型,研究茶多酚对肝脏细胞脂质代谢的影响,以上在有对照组的前提下,茶多酚处理细胞的同时通过MRM诱导hepg2肝癌细胞分化成脂滴,通过对成脂的观察及相关基因表
摘要:目的:以人肝癌hepg2细胞系为模型,探究茶多酚对肝脏细胞脂质代谢的影响。方法:将细胞接种至12孔培养板中,分别与24小时和48小时进行用油酸HepG2细胞成脂;同时对处理组细胞分别用不同浓度的茶多酚(50ug/ml和100ug/ml)处理。72小时后用光学显微镜观察对照组和处理组细胞的脂滴含量,并通过实时荧光定量PCR技术测定HepG2细胞脂质代谢通路相关基因的表达量。结果:对照组的脂滴数量明显多于处理组(P<0.05);荧光定量PCR结果显示处理组脂质降解相关基因的表达量与对照组相比明显增多(P<0.05)。结论:茶多酚能够通过升高脂质降解基因的表达量来减少脂肪的堆积。
关键词: 茶多酚,hepg2肝癌细胞,脂质代谢,基因表达
The effects of tea polyphenols on the lipid metabolism of hepg2 liver cells
The effects of tea polyphenol on lipid metabolism were investigated using human hepatoma Hepg2 cells. Steatosis was induced by treating cells with oleic acid after the cells were seeded into 12-well for 24h and 48h. During this period, cells were treated with or without two concentrations (50 ug/ml and 100 ug/ml) of tea polyphenols. After a further 24h, the content of lipid droplets of different groups were examined by light microscope, and the expression level of some genes regarding lipid metabolism were tested by qPCR. The results showed that the content of lipid droplets were significanly decreased in both tea polyphenols-treated groups than in control group (P<0.05). Moreover, compared the control group, the tea polyphenols-treated groups exhibited significantly high expression level of lipolysis genes (P<0.05). In conclusion, tea polyphenols can protest against lipid accumulation through increasing the expression level of some lipolysis genes in Hepg2 cells.
Key words: Tea polyphenol HepG2 liver cancer cell lipid metabolism gene expression
目录
关键词 1
引 言 2
1 实验材料和方法 3
1.1 实验仪器 3
1.2 实验材料 3
1.3实验试剂 4
1.4 实验试剂的配制 4
1.4.1 茶多酚 4
1.4.2 MEM培养基 4
1.4.3 诱导剂 4
1.5 实验方法 4
1.5.1细胞复苏及铺板 4
1.5.2 细胞用茶多酚处理 5
1.5.3 结果测定 5
1.6 统计学分析 5
2 结果 5
2.1细胞形态变化 5
2.1.1 茶多酚处理后hepg2肝癌细胞生长状态 5
2.1.2 茶多酚处理后诱导分化的细胞 6
2.2 细胞分化状态 7
2.3 细胞脂滴数量及相关基因表达量 7
3. 结论与讨论 8
参考文献 9
茶多酚对HepG2肝癌细胞脂质代谢的影响
引 言
现在越来越多的人因为生活水平的提高,肥胖成了一个新时代的问题,根据倪国华等研究的中国肥胖流行的现状和趋势显示[1]:根据中国家庭健康营养调查数据库统计了我国的几年之间的成人肥胖率和超重的变化形式。分析结果显示,在跟踪的几年间我国的肥胖率呈现急剧上升的趋势。严重的肥胖趋势提醒我们应该防范胖与未然,减轻肥胖带来的社会压力。根据马丽芳等人研究的成人超重肥胖的危害及其影响因素显示[2]:他们根据多阶段整群随机抽样法抽上海市黄浦区的3条街道6个社区一共1360名成人,使用问卷和医学体检相结合,分析这些人超重及肥胖发生情况和其危害。结果显示肥胖和超重的人患高血压,糖尿病,血脂异常的几率要比正常体重的人高很多。肥胖主要是机体代谢失调,可以影响到我们身体的正常生理活动。
肥胖可以导致脂肪肝,糖尿病,高血脂等疾病。肥胖类型主要有因为生活方式不好,营养过剩,缺乏运动造成的单纯性肥胖,也有因为疾病而造成的肥胖。
在现在这个以瘦为美的世界,减肥成为当下最流行的行为。现在市场上有很多种类的减肥产品层出不穷,各种健身俱乐部也是崛地而起,大多的肥胖患者选择节食,但是节食又非常痛苦,运动又无法坚持,药物的副作用很大,由很容易反弹,所以医学界也在寻找和研究新的高效的减肥药物,越来越多的研究者把研究转向天然自然的减肥药的开发。像洋葱,由李恒彪,曾斌,向阳,蔡翔,傅冬和编写的洋葱辅助调脂减肥功效研究显示[3] 探讨洋葱辅助降脂减肥功效。采用0.200、0.400、0.600 g/kg·BW低、中、高3种不同剂量的洋葱粉分别喂样肥胖型和高血脂型的小鼠30 d,测洋葱粉对、体重、动脉硬化指数等对脂肪系数的影响。结果显示洋葱可以降低小鼠体重、,有辅助降脂减肥功效。