在人类的脑力或者体力到达一定阶段时，必然出现的一种名为疲劳的机体复杂生理生化变化过程。疲劳一方面使人类的工作能力暂时下降，另一方面也会成为机体发展到伤病状态的先兆[2]。在1982年第五届国际运动生化学术会议中，首次将疲劳定义为“由机体运动本身所引起的‘机体生理过程不能维持预定的运动强度或不能持续其功能在特定水平’的机体运动能力下降的现象”[3]。据研究显示，运动后体内产生大量的致疲劳物质（包括但不限于：乳酸、血氨、血尿素胆等）是疲劳的元凶，那么，我们就可以通过食用某些食物（或饮用某些饮品)降低这些成分的含量，借此达到抗疲劳的效果。根据红牛广告中描述的效果，此次试验的目的在于测定红牛饮料是否能提升小鼠的运动能力，使小鼠能够持续更长时间的运动

综上，本实验拟C57BL/6J小鼠为模型，通过测定小鼠负重竭力游泳时间，血清血尿素氮、丙二醛，肝脏肝糖原，肌肉肌糖原含量等方面探究红牛饮料小鼠运动耐力的影响。

1材料与方法

1.1材料与试剂（下述材料与试剂皆由实验室提供）

红牛饮料，小鼠，0.9％的Nacl，30%的KOH，标准葡萄糖液（0.05㎎/ml），50％的冰醋酸，双蒸水，显色剂，血尿素胆试剂盒(BUN)，蒽铜，丙二醛试剂盒。

1.2仪器与设备（下述仪器与设备皆由实验室提供）

电子天平，100ml容量，721可见光分光光度计，各量程的移液管，玻璃试管，移液枪，沸水浴箱，漩涡混匀器，离心机。

1.3小鼠处理与指标测定

1.3.1小鼠饲养及分组

将 12 只年龄相仿，体重相近的健康小鼠按照体重相似性分为 2 组,每组 6 只，其中一组为对照组，一组为处理组。对所有的小鼠进行编号以便于在后续的工作中进行区分。首先进行为期1周的适应性喂养，在此阶段不进行数据记录。配置按照体重比例计算浓度的红牛稀释液，代替饮用水对处理组的小鼠进行喂食，喂食时间为4周，并每周对小鼠的体重和采食量进行记录。同时维持小鼠饲养装置内的水量和食量，防止发生小鼠饥饿时无物可食或需要补充水分时无水可饮用的情况。对照组小鼠使用正常饮用水饲养，其他方面同处理组小鼠相同。

1.3.2小鼠体重与采食量测定

   在对小鼠进行喂食红牛饮料前，测定其采食量与体重，此为初始数据。随后每周固定时间记录并整理小鼠采食量与体重，力竭游泳前一次称量记为最后一次，并据此次所测定的体重计算力竭游泳负重重量。

1.3.3小鼠竭力游泳时间的测定

上图为进行小鼠竭力游泳实验使用的装置，黑色为大水槽的边框线，深蓝色为水量的表示线，浅蓝色为水。将小鼠置于水深50㎝的专用游泳容器中，水温保持25℃-30℃之间 ，令小鼠游泳直到竭力。从小鼠放入水箱中的时刻按下计时器开始记录时间，当小鼠全身没于水面以下并且在8S内不能够浮出水面即视为竭力 ，再次按下计时器即为游泳至竭力的时间，随后将小鼠救出以便进行下一步实验。最后，将上述数据记录并整理。（特别注意：当发生小鼠因未知原因不进行游泳直接沉入水中或能够轻松在水面上停留过长时间时，该小鼠的一次力竭游泳时间作废。）

1.3.4小鼠血清和组织的分离与提取

   在上述实验（即一次性竭力游泳实验）进行到小鼠被判定竭力时立即救出小鼠，迅速对其挖眼球取血，并取出肝脏、肌肉组织，并放进液氮中保存，最后取出放进冰箱中低温保存备用。

1.3.5血尿素氮（BUN）含量测定

本次实验采用血尿素氮试剂盒中提供的二乙酰肟法测定血清中血尿素氮（BUN）的含量。分为测试管、标准管和空白管，分别加样如下：