摘要：通过研究蚂蟥在不同出冬眠模式下行为活动状态和各消化酶活性变化，寻找最佳出动眠模式。方法：采用3，5-二硝基水杨酸比色法、对-棕榈酸硝基苯酯(p-NPP)比色法和福林-酚法测定蚂蟥体内淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶。结果表明：随着时间的延长和温度的升高，蚂蟥的生命活动逐渐增强，直接回温模式下稳定72h后，蚂蟥肠道内消化酶活性均完全恢复，且投喂组消化酶活性要强于非投喂组；梯度回温模式下15℃时，蚂蟥肠道内消化酶活性趋近于正常值，且投喂组消化酶活性强于非投喂组。结论：为螺蛳对蚂蟥出眠时消化酶的恢复有诱导作用，梯度回温是较适宜的出眠方式。

关键词：蚂蟥；出冬眠；淀粉酶；蛋白酶；脂肪酶

Research on the effects of different hibernation model on digestive enzymes of Whitmania Pigra Whitman

Abstract:Through the study of leech in different hibernation mode behavioral activity and digestive enzyme activity changes, to find the best sleep mode. Methods: Amylase, lipase and protease were measured by 3,5-dinitrosalicylic acid colorimetry, p-NPP colorimetric method and phenolic-phenol method. The results showed that the activity of leech was gradually increased with the prolongation of time and temperature, and the activity of digestive enzymes in the intestine of the leech was completely restored after 72 hours of stable temperature, and the activity of digestive enzymes in the feeding group was stronger than that in the untreated group The activity of digestive enzymes in the intestinal tract of the leech was similar to that of the untreated group, and the activity of digestive enzyme in the feeding group was stronger than that in the non - feeding group. Conclusion: The snail is the most important way to sleep in the recovery of digestive enzymes.

Key words: Whitmania Pigra Whitman;Out of hibernation;Amylase;Protease;Lipase

目  录

摘要 1

关键词 1

Abstract 1

Key words 1

引言 1

1  材料与方法 2

1.1  实验材料与仪器 2

1.2  方法 2

1.2.1  蚂蟥冬眠模式的制备 2

1.2.2出冬眠模式的设计 2

1.2.3  样品酶液的制备 3

1.2.4  样品的淀粉酶活性测定 3

1.2.5  样品的脂肪酶活性测定 3

1.2.6  样品的蛋白酶活性测定 3

1.2.7  实验所需溶液 3

1.2.8  数据分析 3

2  结果与分析 3

2.1  不同出冬眠模式下蚂蟥的形态学观察 3

2.1.1  直接回温模式下蚂蟥的形态学观察 3

2.1.2  梯度回温模式下蚂蟥的形态学观察 4

2.2  不同出冬眠模式下消化酶的测定结果 4

2.2.1  直接回温模式下消化酶的测定结果 4

2.2.2  梯度回温模式下消化酶的测定结果 5

3  讨论 6

3.1  投喂方式对蚂蟥出冬眠消化酶活性的影响 6

3.2  环境温度对蚂蟥出冬眠消化酶活性的影响 6

3.3  小结 7

致谢 7

参考文献 8

图1直接回温模式下稳定12h解剖图 4

图2直接回温模式下稳定24h解剖图 4

图3直接回温模式下稳定72h解剖图 4

图4梯度回温模式下5℃解剖图 4

图5梯度回温模式下10℃解剖图 4

图6梯度回温模式下20℃解剖图 4

不同出冬眠模式对蚂蟥消化酶影响的研究

蚂蟥(Whitmania Pigra Whitman)，又称为宽体金线蛭，隶属于蛭纲(Hirudinea)无吻蛭目黄蛭科[1](Haemo pidae)，属于高度特化的环节动物,目前已知全世界共有300多种,在我国境内分布的有62种[2]。蚂蟥是《中华人民共和国药典》[3]2015年版收载的三种水蛭之一，有破血、逐瘀、通经的功能,是众多心脑血管中成药的主要材料，其药用价值在西方也有一席之地。

随着市场需求的激增和环境污染的加剧，导致蚂蟥等基源动物濒临灭绝，我们对蚂蟥的人工养殖的关注度大大提升。但是，蚂蟥是变温动物，具有“冬眠”的习性，这种习性极大程度的影响了蚂蟥养殖业的生产效率和经济效益。相关酶活性的测定前人已经做了大量实验。前人实验数据表明，在最适宜的温度以下，酶的活性随着温度的升高而逐渐增加，超过最适温度时，酶的活性随着温度的升高却逐渐降低[4-5]。近几年来，有关蚂蟥冬眠的临近环境以及蚂蟥冬眠过程中机体的变化都进行了相关的研究，尚未见到关于蚂蟥出眠方面的报道。本实验拟在前期实验的基础上以蚂蟥为实验材料，研究不同出冬眠模式对蚂蟥消化酶活性的影响，丰富蚂蟥冬眠的生理内容，为蚂蟥出冬眠后的人工养殖管理提供有效科学依据。