1.2.2 样品制备 植株釆样:海南基地在2015 年4月到2015 年11月的幼苗期(5月)、生长旺期(6月)、根茎形成期(7月)和成熟期(10月)对供试菊芋品系的
1.2.2 样品制备
植株釆样:海南基地在2015 年4月到2015 年11月的幼苗期(5月)、生长旺期(6月)、根茎形成期(7月)和成熟期(10月)对供试菊芋品系的生长表型性状和地上部分、地下部分(根状茎与根系)重量(干、鲜重及含水量)进行测定。生长表型性状主要包括株高、根长、茎粗、分支数等,每项指标每个品系测定植株重复8-10株。其中株高和根长利用卷尺测量,而茎粗利用游标卡尺进行测定并统计其分支数。并分别按根状茎、根系、茎和叶称鲜重并烘干称重后磨细过30目筛备分析用,称重使用产自梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司的AL204电子天平。
大丰基地的采样时间为2016年4月到2016年11月的幼苗期(5月)、生长旺期(6月)、根茎形成期(7月)和成熟期(10月),其余同上。
可溶性总糖的提取:将根、茎、叶(四个时期的样品)等鲜样置于烘箱中75 ℃下恒温烘48 h;组织样品研磨后,与去离子水按1:3(g/ml)比例混匀,放进100 ℃的水浴锅中20 min以去除蛋白,反复抽提3次,收集3次提取的所有溶液;将第二步所得
的溶液过滤,滤液10319 r/min离心20 min,收集上清;所获得的滤液过固相萃提柱GravePureTM SPE C18-Max(GRACE公司),滤液过0.45 μm水相滤膜过滤,获取上样液,以备分析用[26]。
1.2.3 糖分含量的测定 可溶性总糖(total soluble sugar,TSS)含量的测定采用苯酚-硫酸法;总还原糖(total reducing sugar,TRS)含量的测定采用DNS法。
1.2.4 糖组分含量的测定 果糖、葡萄糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖HPLC-ELSD检测:取0.5 ml上样液于上样瓶中,用高效液相色谱仪进行测定,经蒸发光检测器检测。样品进样量为10 μL,梯度洗脱条件为:流速1 mL/min,每次样品的运行时间为55 min。0-15 min流动相:35%水(B),65%乙腈(C);15-30 min流动相:35%水(B),65%乙腈(C);30-40 min流动相:50%水(B),50%乙腈(C);40-42 min流动相:50%水(B),50%乙腈(C);42-45 min流动相:25% 水(B),75%乙腈(C)(“%”表示体积百分含量)。
1.2.5 实验仪器 UV-1800 Shimadzu corporation Kyoto Japan, Agilent 1200 高效液相色谱仪
1.2.6 数据统计分析 利用Microsoft Excel 201和SPSS 19.0软件进行实验数据的统计分析。
2 结果与分析
2.1 不同气候带下N1和Q2的形态学分析
2.1.1 不同气候带下不同时期N1和Q2的形态学特征 如表1所示,大丰Q2在10月份株高均值为343.33 cm,茎粗均值为2.30 cm,根长均值为30.67 cm,均为两个品种两个气候带中的最大值,表明10月份,大丰Q2的长势最好。
表1 不同气候带不同时期N1和Q2的形态学特征
品系Lines 株高 Plant height (cm) 茎粗 Stem diameter (cm) 根长 Root length (cm)
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
海南N1 69.23±5.47a 117.67±3.09b 106.67±9.74b 177.78±14.75c 0.64±0.11a 1.13±0.08 ab 1.51±0.35ab 1.64±0.50b 15.33±2.87a 19.67±3.09a 19.00±3.74a 19.67±2.62c
海南Q2 56.33±3.86a 101.67±9.46b 103.33±2.05b 123.89±11.83b 0.45±0.06a 0.81±0.05 ab 1.64±0.24b 1.38±0.30b 15.50±0.71a 15.00±0.82a 15.89±4.09a 18.33±3.30a
大丰N1 26.33±4.19a 95.67±8.58b 191.00±6.98c 283.67±36.23d 0.67±0.05a 1.10±0.08ab 1.73±0.21bc 2.10±0.51c 9.00±0.82a 12.33±0.47ab 17.33±1.70bc 19.67±2.62c
大丰Q2 25.67±1.25a 120.67±1.7b 219.33±14.84c 343.33±11.15d 0.30±0.08a 0.90±0.08 a 2.07±0.38b 2.3±0.33b 15.00±2.83a 17.00±0.01a 20.67±1.70ab 30.67±5.31b
Ⅰ: 5月份采样;Ⅱ:6月份采样;Ⅲ:7月份采样;Ⅳ:10月份采样
数值为平均值±标准误;不同的小写字母表示不同时期在0.05水平上差异显著
2.1.2 不同气候带不同时期N1和Q2株高的比较 如图1(左)所示,大丰与海南N1的株高在菊芋的整个生长期均呈上升趋势,大丰的上升趋势明显,海南的呈缓慢上升趋势。生长初期即5月份大丰的株高为26.33 cm,海南为69.23 cm;而在成熟期即10月份,大丰的菊芋株高均值为252.33 cm,海南的为177.78 cm。表明在生长初期海南的N1生长比较迅速,但10月份大丰的长势更好。