乐虎保健饮料对小鼠抗疲劳作用的研究(2)

“喝乐虎,提神抗疲劳,激发正能量!”专家表示,有一定的提神效果,确没有广告说的那么神奇,毕竟造成疲劳的原因有很多,类似这些的广告很容易给


“喝乐虎,提神抗疲劳,激发正能量!”专家表示,有一定的提神效果,确没有广告说的那么神奇,毕竟造成疲劳的原因有很多,类似这些的广告很容易给人造成误解。故本实验选择乐虎为实验材料,对小鼠进行实验,来验证乐虎等保健品是否真的具有抗疲劳作用。

1.材料与方法

1.1材料与试剂

1.1.1实验动物

取12只同龄健康、游泳正常的雄性小鼠作为实验对象,同周龄,体重约27~35克,由周口市师范学院神经生物学与转化医学研究所提供。

1.1.2实验药品

实验药品为乐虎保健饮料,于市场销售处购买获得。

药品规格为:“乐虎”的包装分为250ml罐装和380ml瓶装(牛磺酸强化型),主要成分为牛磺酸和肌醇,“乐虎”生产过程已通过GMP标准认证。在使用之前,将乐虎与蒸馏水混合配成6%浓度的溶液待用。

1.2仪器与设备

电热恒温水浴锅                      上海恒科学仪器有限公司

快速混匀器                          江苏新康医疗器械有限公司

电子天秤                            上海奥豪斯仪器有限公司

蒽酮试剂                            天津市科密欧化学试剂有限公司

可见光分光光度计                    上海元析仪器有限公司

离心机                              中国江苏金坛市医疗仪器厂

BCD-215KCM冰箱                      青岛海尔股份有限公司

移液管、移液枪、容量瓶、试管、计时器等。

1.3小鼠处理与指标测定

1.3.1小鼠喂养及分组

将12只生理状况相同的雄性小鼠至于23℃左右室温,55%湿度的实验室中, 自由摄取水及饲料。然后将小鼠按体重分为处理组和对照组,每组6只,并分别打上耳号。对小鼠进行初始称重和摄食,记为第“0”次。之后,一周测一次体重,三天称一次采食量,最后整理数据制作为表格。

喂药期间,需结合小鼠的体重(约27g)和日饮水量(4~7 ml/day)算出小鼠需每天饮入的乐虎饮料为0.171ml/ day/kg,以此为标准,将乐虎保健品饮料溶于对照组小鼠饮水中,并进行每天喂食。对照组饮水中不加乐虎饮料,正常饮食。

1.3.2小鼠血清和组织的分离与提取

在小鼠实验的4周期间内,让所有的小鼠在25℃水温中适应性游泳2次,每次10分钟。4周后,于小鼠尾系一重量约为小鼠体重量5%的铁丝负重物,将小鼠置于游泳箱中强迫游泳至力竭,并记录开始游泳至力竭的时间,为力竭游泳时间t。然后挖眼球取血,解剖,并取出肝脏组织,肌肉组织。从血液中分离到的血清,及取出的肝脏和肌肉组织-70℃冰箱中保存备用。

1.3.3小鼠体重测定

对于选取的实验小鼠,实验之前先称重一次,然后每星期取固定的时间再次进行称重,每次称重约隔7天。最后1次称重到小鼠最后1次力竭运动前。

1.3.4小鼠竭力游泳时间的测定

   将定量乐虎保健饮料加蒸馏水中喂养小鼠,3天换一次水,并且保证小鼠每天都有喝到,喂养4周。然后进行负重游泳实验,将小鼠置于水深50㎝的专用游泳容器中,水温25℃左右 ,让小鼠游泳直到竭力,在小鼠放入水箱中那一刻,按下计时器,开始记录时间,以小鼠全身没于水面以下,8S内不能浮出水面即为力竭[8] ,按下计时器,即为游泳至力竭的时间。将数据记录并整理。