CcOI含有12个以三重轴对称方式排列在膜中的跨膜螺旋结构,其分布在膜外的部分很少,是细胞色素C氧化酶亚基中最大且最为保守的亚基[3]。在CcOI结构中还
CcOI含有12个以三重轴对称方式排列在膜中的跨膜螺旋结构,其分布在膜外的部分很少,是细胞色素C氧化酶亚基中最大且最为保守的亚基[3]。在CcOI结构中还含有2个血红素,一个为螺旋化程度底的的血红素a(hemea),另一个为螺旋化程度高的血红素a3(hemea3),其中血红素a3与铜离子(CuB)一起形成的双核中心是O2的还原催化部位。而hemea则被认为在电子传递的过程中发挥着作用[4]。
油菜(BrassicanapusL.)为十字花科植物,作为世界四大主要油料作物之一,其产量居世界油料作物产量的第3位[5]。油菜的线粒体基因组较其它植物的线粒体基因组小。通过对油菜线粒体CcOI蛋白亚基进行研究,有助于进一步加强我们对CcO蛋白的整体结构域功能的认识。而利用生物信息学同源建模方法是获得蛋白质结构的最快方法,也是目前非试验方法获得蛋白高级结构的最可靠方法。本文主要对油菜CcOI蛋白亚基进行高级结构预测和评价分析,以获得其功能信息。
1材料和方法
1.1序列来源数据库
从美国国立信息技术中心NCBI GeneBank数据库中查询下载油菜线粒体CcOI蛋白亚基序列,如下:
>gi|353526672|ref|YP_004927841.1|cox1(mitochondrion)[Brassicarapasubsp.oleifera]MKNLVRWLFSTNHKDIGTLYFIFGAIAGVMGTCFSVLIRMELARPGDQILGGNHQLYNVLITAHAFLMIFFMVMPAMIGGFGNWFVPILIGAPDMAFPRLNNISFWLLPPSLLLLLSSALVEVGSGTGWTVYPPLSGITSHSGGAVDLAIFSLHLSGVSSILGSINFITTIFNMRGPGMTMHRLPLFVWSVLVTAFLLLLSLPVLAGAITMLLTDRNFNTTFFDPAGGGDPILYQHLFWFFGHPEVYILILPGFGIISHIVSTFSGKPVFGYLGMVYAMISIGVLGFLVWAHHMFTVGLDVDTRAYFTAATMIIAVPTGIKIFSWIATMWGGSIQYKTPMLFAVGFIFLFTIGGLTGIVLANSGLDIALHDTYYVVAHFHYVLSMGAVFALFAGFYYWVGKIFGRTYPETLGQIHFWITFFGVNLTFFPMHFLGLSGMPRRIPDYPDAYAGWNALSSFGSYISVVGICCFFVVVTITLSSGNNKRCAPSPWALELNSTTLEWMVQSPPAFHTFGELPAIKETKSYVK
1.2生物信息学分析方法及软件
1.2.1理化性质预测结果
以软件Protparam(http://web.expasy.org/protparam/)计算油菜线粒体CcOI蛋白亚基的基本理化性质;
1.2.2跨膜与疏水性分析
以ProtScale软件方法预测油菜线粒体CcOI蛋白亚基的疏水性,TMHMM软件进行其跨膜分析。
1.2.3基因的电子表达和保守域分析
通过采用Unigene和EST数据库对油菜线粒体CcOI蛋白亚基电子表达谱进行分析。利用GSDS软件预测基因结构;利用mega5工具进行保守域分析。