(3)在树脂上缀合氨基酸 从冰箱中取出首个氨基酸放至室温后,用电子天平称量0.188 g Fmoc-Lys(Boc)-OH置于小试管中,用移液枪吸取3 ml的DMF和2 ml的缩合剂加
(3)在树脂上缀合氨基酸
从冰箱中取出首个氨基酸放至室温后,用电子天平称量0.188 g Fmoc-Lys(Boc)-OH置于小试管中,用移液枪吸取3 ml的DMF和2 ml的缩合剂加入到小试管中,涡旋,使其充分溶解后加入反应合成器中,耦合2.5小时。
(4)定性检测
将耦合完成的树脂用DMF冲洗4次,检测氨基酸耦合是否完全。在反应合成器中取微量的缀合有赖氨酸的树脂置于小试管中,加入茚三酮溶液、苯酚/乙醇溶液各两滴,涡旋,使其充分混匀。在烘箱温度达到110 ℃左右时,将小试管置于烘箱中5 min,取出后,以白纸为背景观察小试管中是否呈蓝色,若溶液透明为阴性,可进行脱保护,耦合下一个氨基酸;若呈蓝色为阳性,则要进行氨基酸的重复耦合,直至检测无颜色反应。