30%蔗糖溶液：取30g蔗糖溶于100ml蒸馏水中。

1.3主要仪器用品

组培瓶，镊子，培养皿，锥形瓶，灭菌锅，超净工作台，电子天平，pH计，移液枪，玻璃棒，电磁炉，烧杯，体视镜，冷冻切片机，磁力搅拌器，离心管。

2.试验方法步骤

2.1无菌苗的获得

2.1.1萌发培养基的配置

按比例量取MS的母液于烧杯中，溶解于蒸馏水中，按照每升30g的比例加入蔗糖，定容，调剂pH至5.8，按照每升7.9g的比例加入琼脂粉。在121℃，灭菌15min。在超净工作台中将培养基倒入组培瓶中备用。

2.1.2无菌苗的培养

将种子置于洁净的离心管中，于超净工作台中用75%酒精消毒3min，将酒精全部倒掉，用无菌水洗涤3次，再用0.1%HgCl2消毒15-20min，最后用无菌水充分洗涤5-7次，接种在萌发培养基上，每瓶3~4粒种子，接种80瓶，置于黑暗环境中培养（25℃）三天后，一半移至光照环境中培养正常无菌苗，另一半继续置于黑暗环境中培养得到黄化苗。

2.2愈伤组织的获得

2.2.1诱导培养基的配制

按比例量取MS的母液于烧杯中，溶解于蒸馏水中，按照每升30g的比例加入蔗糖，定容，调剂pH至5.8，按照每升3.75g的比例加入结冷胶。每500ml分装于一个1000ml的锥形瓶中，按照设计好的激素浓度加入NAA和2,4-D，并标好浓度种类以示区别。在121℃，灭菌15min。在超净工作台中将培养基倒入培养皿中备用。

2.2.2愈伤组织的诱导

取7d苗龄的无菌苗，分别切取根（5mm）、茎（5mm）、叶片（25mm2）分别平铺接种于不同的诱导培养基上。每瓶放置5块外植体，培养温度控制在25±2℃，黑暗下培养30d，期间更换一次培养基。在此期间每三天观察一次外植体的愈伤组织的长势变化，并记录。