3.2.1 黄山一号灵芝多糖提取响应面实验结果 - 12 -

3.2.2 龙芝二号灵芝多糖提取正交实验结果 - 14 -

3.3 多糖分子量结果 - 17 -

3.4灵芝多糖结构分析结果 - 18 -

3.4.1 红外光谱分析结果 - 18 -

3.4.2紫外光谱分析结果 - 19 -

3.4.3扫描电子显微镜分析结果 - 20 -

3.5 灵芝多糖生物活性分析 - 22 -

3.5.1 还原力测定结果 - 22 -

3.5.2 DPPH自由基清除能力 - 22 -

3.5.3 过氧化氢清除率 - 23 -

3.5.4 羟基自由基清除率 - 24 -

3.5.5 Abts总抗氧化能力 - 24 -

3.5.6 体外抑制酪氨酸酶 - 25 -

4结论 - 26 -

5不足之处与展望 - 27 -

5.1 不足之处 - 27 -

5.2毕业设计展望 - 27 -

致谢 - 29 -

参考文献 - 30 -

1绪论

1.1 灵芝多糖研究进展

灵芝（Ganoderma lucidum）属于担子菌纲、多孔菌科、灵芝亚科、灵芝属。从古至今灵芝一直被誉为我国珍贵的生物资源（Biological resources），在古时候就已被广泛应用，现代科学研究更是发现其更多生物功能，并且在化妆品、保健品与药品等领域已开发应用。灵芝的生物活性十分丰富，到目前为止，从灵芝中分离出来的化合物约有150余种，其中多糖类、三萜类、蛋白质类这三类为主要活性。同时多糖作为灵芝的主要活性之一，它主要活性的功能成分具有抗氧化、清除自由基抗衰老、抑制肿瘤细胞增殖、抗惊厥，抗栓降糖，抗辐射突变，护肝等生理功能[1]。由于灵芝的品种繁多，品种之间存在一定的差异，都有可能导致其有效的多糖成分在含量上的差距。即使是同一品种的菌株，在其生长过程中，会因营养、栽培方式及外界环境的差异，仍可以导致多糖含量表达的不同。因此，灵芝多糖的研究受到了越来越多科学工作者的重视。

1.1.1 灵芝多糖提取工艺的研究进展

目前灵芝多糖的提取方法较多，常见的提取方法有沸水浴提取、热水浸提、超声波提取、乙醇沉淀等。

周吴萍[2]用灵芝作原料来提取灵芝多糖，利用蒽酮—硫酸法来测定提取液中的多糖含量，同时设计单因素实验，考查提取方法和提取溶剂相互之间对多糖提取率的影响，并采用正交试验设计优化提取工艺。结果表明，采用回流提取法，先使用蒸馏水作提取溶剂，后使用体积分数55％的乙醇溶液作提取溶剂，每次提取的时候浸润半小时、料液比（m 灵芝质量∶V 提取溶剂体积）为1:20（g/mL）、提取时间1.5 h，实验得出灵芝多糖的含量较高，为1.75％。

李凤林等人[3]通过超声波法实验确定灵芝多糖提取的最佳工艺条件。利用单因素实验和响应面回归组合设计方案对实验的条件进行优化。结果显示，灵芝多糖的超声波提取法的最优工艺条件为：料液比（g/mL）1∶35、超声功率(W) 80、超声温度(℃) 50、超声时间(min) 35，并使用此条件对灵芝多糖进行提取，得出实际提取率为2．06％。

Ruey Chi Hsu[4]用超临界CO2萃取和乙醇改性来提取灵芝多糖。研究表明超临界提取适合的提取灵芝多糖。超临界萃取具有较高的提取率,比传统的溶剂萃取的提取温度更低，可以有效保护多糖结构不被破坏。

王谦，钱先来[5]为了寻找一种高效率的灵芝多糖提取工艺，利用单因素实验和响应面实验。采用微波法提取灵芝多糖，其对弱碱性介质下进行了优化研究。得出各因素对灵芝多糖提取率的影响从高到低为：提取时间，pH 值，固液质量比，预浸时间。通过实验得出最优提取条件为：预浸时间为1.5 h；提取时间为15 min；固液质量比为1 :110；pH为8.0 ，提取2次。使用最优提取条件得出灵芝多糖提取率为3.200 %，结果表明：此方法能明显提高灵芝多糖的提取率。