1.3 本课题研究的意义、目的及内容

1.3.1 本课题的研究内容

本课题所用的两种灵芝——“龙芝一号”和“沪农灵芝一号”由上海农业科学院食用菌研究所提供。本课题研究的是利用热水浸提法提取灵芝子实体多糖，并且设计单因素实验确定两种灵芝的最优提取条件。在最优条件下大量提取两种灵芝的子实体多糖，并计算出得率。利用高速液相色谱仪测定并分析灵芝多糖中所含的不同组分。并且对灵芝子实体多糖进行抗氧化活性的检测，检测指标有还原力、DPPH、总抗氧化能力、羟基自由基清除率、过氧化氢清除率。

（1）选取具有明显特征差异的灵芝品种，进行灵芝多糖的提取

选取五种不同灵芝（沪农一号、龙芝二号、黄山一号、天然灵芝、菌草），分别设置单因素实验，单因素条件为：温度在50℃~90℃区间以10为梯度选取5个温度梯度；在1h~5h区间以1为梯度选取5个时间梯度；在10mL/g~50mL/g区间以10为梯度选取5个料液比梯度。用苯酚硫酸法[15]测定灵芝总糖的含量，二硝基水杨酸法测定灵芝还原糖的含量，再由总糖和还原糖计算出不同灵芝在不同条件下的多糖含量。根据每个品种单因素实验结果分别分析出最优提取条件并进行多糖含量比较，选出多糖含量高的两个灵芝品种进行响应面优化实验。

（2）比较不同品种灵芝多糖的组成与结构表征，优选适合应用于化妆品行业的灵芝品种

根据单因素实验选出的两个灵芝品种进行结构表征。根据响应面实验分析结果选取的最优条件，使用最优条件分别对两个灵芝品种进行样品制备。对两种样品进行结构表征进行差异比较，测定指标包括：灵芝多糖分子量、红外光谱、紫外光谱、扫描电子显微镜。

（3）评价提取液的生物活性，考察其稳定性和安全性

对响应面实验优选出的两个品种，用最优条件进行提取，将提取液浓缩到一定比例，加无水乙醇至使整个溶液中乙醇的浓度达到30%，醇沉两小时，8000r/min下离心10分钟，再用30%乙醇洗涤沉淀两次，得到粗多糖。测定粗多糖的抗氧化性，测定指标有：还原力、DPPH、总抗氧化能力、羟基自由基清除率、过氧化氢清除率。并通过抑制酪氨酸酶实验比较两种灵芝的美白性能。根据各项测定结果进行分析，选出一种生物活性好、稳定性好、安全性高的品种应用在化妆品领域。

1.3.2 本课题研究的目的和意义

灵芝多糖是灵芝中一种重要的活性物质。它具有抗氧化、免疫调节、抗癌等多种生物活性。同时具有很大的开发利用价值。近年来，科学家们发现了领灵芝很多的生物功效，并在化妆品、保健品和药物等领域得到了发展和应用，其寻找天然活性成分的功效成为人们关注的热点。食用菌菇因其天然成分丰富受到广泛重视，其中灵芝因其作为传统的中药，率先应用于化妆品中作为保湿、抗衰老、美白活性的原料。由于灵芝品种繁多、性质差异大，在开发利用灵芝作为化妆品原料上面临寻找合适的品种问题。本课题从具有明显差异的几种灵芝品种中筛选出适合应用于化妆品领域的灵芝品种，从而加大了灵芝在化妆品领域的应用。