摘要：以“骄阳”（Sunburst）和“黑曜”（Obsidian）两种矾根品种的幼嫩叶柄与叶片分别作为外植体，以MS培养基为基本培养基，进行植物组织培养与快速繁殖技术的研究，深入探讨了两种矾根的愈伤组织诱导、丛生芽诱导的最佳培养基和生根的适宜培养基。结果表明：选用两种矾根品种“骄阳”和“黑曜”的幼嫩叶柄作为外植体材料进行组织培养时快繁效果最好。其愈伤组织诱导的最佳培养基配方均是以MS为基本培养基，矾根“骄阳”补充0.2 mg·L-1 6-BA和0.05 mg·L-1 NAA，矾根“黑曜”补充0.2 mg·L-1 6-BA 和0.03 mg·L-1 NAA；其丛生芽的最佳诱导培养基配方均是以MS为基本培养基，补充0.1 mg·L-1 6-BA和0.05 mg·L-1 NAA；以及生根的适宜培养基均为MS基本培养基。

关键词：矾根；“骄阳”品种；组织培养；快速繁殖

Tissue culture and rapid propagation in two varieties of Heuchera micrantha

Abstract: The young petioles and leaves of Sunburst and Obsidian as explants and Murashige and Skoog（MS）medium as basic medium were used to study the plant tissue culture and rapid propagation，exploring the optimum medium of callus induction and bud induction and the suitable medium of rooting.The results showed that it had the best effect when petioles from Sunburst and Obsidian were used as explants.The best medium for the callus induction of them was based on MS as the basic medium，the Sunburst supplemented 6-benzyladenine（6-BA）0.2 mg·L-1 and naphthaleneacetic（NAA）0.05 mg·L-1，and the Obsidian supplemented 0.2 mg·L-1 6-BA and 0.03 mg·L-1 NAA.The most suitable bud induction medium of them was based on MS as the basic medium，and supplemented 0.1 mg·L-1 6-BA and 0.05 mg·L-1 NAA，and the suitable rooting medium was MS basic medium.

Key Words:  Heuchera micrantha；Sunburst；Tissue culture；Rapid propagation

目录

1. 绪论 1

1.1 植物生长调节剂对组织培养的影响 1

1.2 不同外植体材料对组织培养的影响 2

1.3 不同品种植物对组织培养的影响 3

1.4 特殊现象对组织培养的影响 4

1.5 本课题的研究意义与内容 5

2. 材料和方法 6

2.1 实验材料 6

2.2 实验试剂 6

2.3 实验仪器设备 6

2.4 实验方法 7

2.4.1 外植体的预处理 7

2.4.2 外植体的筛选 7

2.4.3 丛生芽诱导培养基的筛选 7

2.4.4 生根培养基的筛选 8

3. 结果与讨论 9

3.1 不同外植体材料对矾根愈伤组织诱导的影响 9

3.2 丛生芽诱导培养基的筛选 12

3.3 生根培养 14

4. 结论 15

致   谢 17

参考文献 18

1. 绪论

1.1 植物生长调节剂在组织培养中的应用

植物生长调节剂主要影响愈伤组织的诱导以及脱分化再分化过程，或是促进，亦或是抑制。相关试验结果就表明，针对植物的外植体进行愈伤组织诱导、芽诱导及分化、根系分化时，不同浓度配比的同种植物生长调节剂或是不同种植物生长调节剂之间的浓度配比均会对其整个培养过程造成巨大的影响[1]。

细胞分裂素类与生长素类作为植物生长调节剂的主要两大类，运用不同的浓度梯度形成不同的相互配比，影响愈伤组织的诱导及分化过程包括芽分化、根分化等，从而影响整个植物组织培养过程。大多数的试验都选用生长素类NAA[2]、2,4-D以及细胞分裂素类6-BA[2]作为植物激素进行调节以及诱导分化。两类激素的相互搭配以及浓度高低的适宜配比可使植物外植体材料诱导形成优良的愈伤组织[3]，究其本质，即是植物的体细胞经过两类激素的刺激与诱导，导致其体细胞胚胎发生，向愈伤组织不断转化。表面上，植物生长调节剂刺激外植体的体细胞，诱导其不断转变成具备高度的再分化能力的胚性细胞，从而产生拥有旺盛自我繁殖能力的愈伤组织，如此一来，形成的愈伤组织就可逐渐具备发育成完整植株的潜能，从而筛选分离出一批拥有全能性的原生质体[1]，之后的芽诱导、分化以及生根都是以此作为基础。而实际上，可以说是激素激活了某些mRNA基因表达，使其转化合成形成了部分具有特异性多肽或蛋白质，增强了植物体细胞胚胎的活动，加强了其发育，反之，亦可抑制其发育，由于部分基因的未表达或是转化编码出现错误，造成其某些蛋白或多肽分解消失，才致使其胚胎发育产生了阻碍[4]。I Papanastasiou等[5]通过液体脉冲预处理后转移至培养基的方式对咖啡的细胞培养物进行诱导培养试验，研究表明添加50 IM 6-BA后的培养物发生胚胎形成，证明了6-BA作为胚胎分化的诱导剂的重要生理学作用，促进了组织培养的快速发展。