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1.4.4体胚离体再生培养 将类蛙卵胚铺放在添加有KT或ZT的LS固体培养基上。光强120μ•m-2s-1，温度25℃，光周期为16h/8h的环境条件下进行诱导培养和继代培养
1.4.4体胚离体再生培养
将类蛙卵胚铺放在添加有KT或ZT的LS固体培养基上。光强120μ•m-2s-1，温度25℃，光周期为16h/8h的环境条件下进行诱导培养和继代培养。
1.4.5胚性结构的鉴定
采用醋酸洋红和伊文斯蓝双染色[21]对其胚性结构进行鉴定。
染色时，先将待染组织放入醋酸洋红染液中10-15s；取出放入0.1%伊文斯蓝染液10-15s；再次取出材料用清水冲洗即可。
1.4.6切片材料处理
1)挑取诱导4-5周的体细胞胚（颜色逐渐变深，且根由大量水愈伤包裹）置解剖镜下做初步鉴定；
2)将根诱导体胚放置在体视镜下解剖观察并拍照；
3)将剖除水愈伤的体细胞胚放入固定液中固定48h；
4)然后将固定的组织放入10%、20%、30%的蔗糖溶液中，每个浓度处理24h。
1.4.7切片
1)包埋：将材料从30%蔗糖溶液中小心取出，并用OTC（包埋剂）包埋；
2)冷冻:放入切片机-24℃冷冻10min即可；
3)采用冷冻切片技术将待检材料切成8µm厚的薄片（LeicaCM1850），在光学显微镜（OlympusBX41）下进行阅片镜检。