摘  要：本实验以转基因Ta-Rboh拟南芥为研究对象，采用60 mmol/L浓度的钙盐对转基因拟南芥进行处理，研究Ta-Rboh基因对拟南芥抗盐性的响应。主要通过对过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro.)含量五个生理指标进行测定。实验结果表明：对于POD、SOD、CAT、Pro.、MAD这五种生理指标的测定结果表示无论是突变型、野生型还是超表达株系用60 mmol/L 高浓度钙盐处理后都显著提高。其中超表达株系处理前后变化最不明显，突变体植株处理前后变化最显著，野生型植株处理前后变化居中。综上所述Ta-Rboh基因使拟南芥的抗盐性显著的提高。在本实验中，超表达（OE-37-4、OE-26-6-7）的拟南芥植株对高浓度钙盐的抗性最好。

关键词：转基因；拟南芥；抗盐性；Ta-Rboh

Response of Ta-Rboh Gene to Calcium Stress in Arabidopsis Thaliana

Abstract:In this experiment in transgenicTa-rboh Arabidopsis for the study, the use of 60 mmol / l concentration of calcium transgenic Arabidopsis processing, research ta-rboh Gene of Arabidopsis Salt of response. Major by on peroxidase (POD), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) vitality and malondialdehyde (MDA) and pro (Pro.) Content five physiological indicators for determination of experimental results show: for POD,SOD, CAT, Pro., MAD this five physiological the determination of the result indicates whether it is mutant, wild-type or overexpression lines with 60 mmol / l high concentration of calcium after treatment are significantly improve which overexpression strain before and after change the most obvious, mutant plant before and after change the most significant, wild-type plants before and after changes in the Center. In summary ta-rboh Gene the Arabidopsis Salt significantly improved. In this experiment, overexpression (oe-37-4, oe-26-6-7) Arabidopsis plant for high concentration of calcium resistance of the best.

Keywords: Transgenosis;Arabidopsis;Saltresistance;Ta-Rboh

目    录

摘  要 1

引言 1

1 实验材料与方法 3

1.1 主要实验材料 3

1.2 主要实验器材 3

1.3 实验过程及生理指标的测定 3

1.3.1实验过程 3

1.3.2生理指标的测定 3

2 结果与分析 4

2.1 SOD的活性 4

2.2 CAT的活性 5

2.3 POD的活性 6

2.4 MDA含量 7

2.5 Pro.含量 8

3 讨论与结论 8

参考文献 10

致谢 12

Ta-Rboh基因在拟南芥对钙胁迫的响应

引言

在生物体的能量代谢的过程中会产生一类比氧气性质还要活泼的物质，如羟自由基、过氧化氢（H2O2）、氢氧根离子（OH-）、超氧根阴离子（∙O2-）等，这些物质具有很强的氧化能力，这些物质统称为活性氧（reactive oxygen species, ROS）[1-3]。在植物的生长和发育的过程中，ROS作为一种信号分子，也是细胞信号调控和转导的重要物质[4-5]。在病原体初始侵袭的时候传递信号，从而使植物组织产生一系列的抗病防御的反应[6]。当植物受到机械伤害、其他生物或者非生物的胁迫时就会产生一系列的反应，并迅速产生大量的ROS，ROS能够通过本身的毒害作用直接杀死病原菌。此外，一定浓度的ROS可以诱导细胞凋亡，使得病原菌的危害限定在一定的部位而不至于大量扩散出去，从而使植物的伤害降低[7-8]，所以ROS是决定细胞命运较为关键的因子。ROS的浓度决定着其对细胞的作用，低浓度的ROS能够促进细胞的生长，而高浓度ROS则会促进细胞的凋亡，甚至可能导细胞的死亡[9]。Rboh基因是植物体内重要调控与胁迫反应的核心基因。所以本文就利用突变型、野生型、超表达三种不同的转基因拟南芥在高浓度钙盐的胁迫下对Ta-Rboh基因功能的研究。

盐渍是影响植物生长发育的主要逆境因子之一，植物对于盐胁迫耐的受性的研究不仅对培育耐盐的农作物品种具有重要的价值,而且也是植物基因表达调控和信号转导等基础研究的重要内容。随着生物学的不断发展，对植物盐胁迫应答反应机理的研究不断深入，特别是以拟南芥为模式植物在盐胁迫条件下耐盐反应调节途径的研究，取得了卓越的成绩。