5）离心分离：双孢菇悬浊液冷却至室温后，进行离心操作，离心速度为：2000 r/min，时间为20 min。

6）抽滤；使用抽气泵进行抽滤，保留上清液。

7）调节pH：用HCl溶液、NaOH溶液调节上清液，使pH为7[13]。

8）液体浓缩：将上清液用旋转蒸发仪浓缩至原体积的0.25倍。

9）醇沉：取出旋蒸完的上清液，加入4倍上清液体积的无水乙醇溶液，在室温下静置一天（24 h）[14]。

10）收集沉淀：将沉淀收集，加少许蒸馏水溶解。然后放入搅拌子，60 ℃条件下磁力搅拌[15]。

11）冷冻干燥：冷冻干燥后的双孢菇SDF装入自封袋中，在干燥器中存放。

2.3.2 单因素实验

（1）粒径对提取率的影响

   分别称取5份5g 40、60、80、100和120目[11]的双孢菇粉末，倒入蒸馏水，双孢菇粉末与蒸馏水的比例（即料液比）为1:40。然后添加0.80% 的食品级纤维素酶，并调节pH为5.0。接着在50 ℃条件下酶解2.5h。最后计算双孢菇SDF提取率，研究双孢菇粒径对双孢菇SDF提取率（即得率）的影响。

双孢菇SDF得率（%）=m/M×100%  （2-1）

   其中：m为提取双孢菇SDF的重量（g）; M为双孢菇粉末的重量（g）

（2）料液比对提取率的影响[16]

   称取5份5 g 100目的双孢菇粉末，倒入蒸馏水，料液比各为1:20、1:30、1:40、1:50和1:60[17]。添加 0.80% 的食品级纤维素酶，并调节pH为5.0。接着在50 ℃条件下进行酶解，酶解时间为2.5h。最后计算双孢菇SDF提取率，研究料液比对双孢菇SDF提取率的影响[16]。

（3）纤维素酶对提取率的影响

 称取5份5 g 100目的双孢菇粉末，倒入蒸馏水，双孢菇粉末与蒸馏水的比例为1:40[18]。分别加入0.40%、0.60%、0.80%、1.00%和1.20% 的食品级纤维素酶，调节pH值为5.0[19]。接着在50 ℃条件下进行酶解，酶解时间为2.5h。最后计算双孢菇SDF提取率，研究纤维素酶添加量对双孢菇SDF提取率的影响。

(4) 温度对提取率的影响

称取5份5 g 100目的双孢菇粉末，倒入蒸馏水，双孢菇粉末与蒸馏水的比例为1:40[18]。添加0.80%的食品级纤维素酶，调节pH值为5.0。然后分别在40、50、60、70和80 ℃ 条件下进行酶解，酶解时间为2.5h。最后计算双孢菇SDF提取率，研究酶解温度对双孢菇SDF提取率的影响。

(5) 时间对提取率的影响

称取5份5 g 100目的双孢菇粉末，倒入蒸馏水，双孢菇粉末与蒸馏水的比例为1:40[18]。添加0.80%的食品级纤维素酶，调节pH值为5.0。然后在50 ℃条件下进行酶解，酶解时间分别为1.5、2.0、2.5、3.0和3.5 h[20]。计算双孢菇SDF提取率，研究酶解时间对双孢菇SDF提取率的影响。