摘要：为验证过量'Purple haze'紫胡萝卜中DcMYB113基因是否能促进番茄花青苷的合成。根据胡萝卜全基因组和转录组数据库中的碱基序列信息设计引物，从'Purple haze'紫胡萝卜中克隆出了DcMYB113基因，构建在CaMV 35S启动子和Nos终止子之间，然后构建到pCAMBIA 2300植物表达载体上，电击转化至根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101中。用含有目的基因的农杆菌侵染番茄外植体，在筛选培养基上经过脱分化和再分化获得了紫色的抗性植株，并将之转入营养土中继续生长。待果实成熟后，发现转基因的番茄合成了花青苷而呈现了紫黑色。

关键词：番茄；DcMYB113基因；花青苷；紫色

Overexpression of DcMYB113 in tomato promotes anthocyanins biosynthesis

Abstract: To verify whether overexpression of DcMYB113 in 'Purple haze' carrot can promote anthocyanin biosynthesis in tomato, DcMYB113 gene was cloned from cDNA library of 'Purple haze' carrot with the primers designed according to the carrot genome, and was constructed to pCAMBIA 2300 plant expression vector between CaMV 35S promoter and Nos terminator. The construct was then transformed into Agrobacterium tumefaciens (GV3101) followed by transformed into tomato. The transgenic tomato plantlets were transferred to nutrient soil for growth. The transgenic tomato fruits turned to atropurpureus color after ripen.

Key words: Tomato; DcMYB113 gene; Anthocyanin; Purple

目录

摘要3

关键词3

Abstract3

Key words3

引言3

1.材料与方法5

1.1材料5

1.1.1植物材料5

1.1.2试剂盒5

1.2实验方法5

1.2.1胡萝卜总RNA及cDNA的合成5

1.2.2 'Purple haze'胡萝卜DcMYB113基因的克隆5

1.2.3目的基因载体构建和转化农杆菌5

1.2.4农杆菌遗传转化6

2 结果与分析6

2.1 'Purple haze'胡萝卜DcMYB113基因的克隆6

2.2 DcMYB113基因的遗传转化7

3讨论8

致谢9

参考文献9

过量表达DcMYB113促进番茄花青苷的合成

引言：番茄(Solanum lycopersicum)属于茄科，是一年生草本植物，其营养丰富，含有类胡萝卜素、维生素C、A、E、B1、糖分及钾、钙、磷、铁等物质，其中，维生素C的含量尤其高。据测定，每一斤番茄中含有52毫克维生素C。除此之外在番茄中含量较高的还有矿物质和番茄红素，在抗氧化能力方面番茄红素有比较独特的能力,它能够清除自由基,保护细胞,从而保护脱氧核酸及基因避免遭受破坏,并且还能阻止癌变的进程。番茄不仅对癌症具有一定的预防作用,如前列腺癌，还能有效减少各种癌症带来的发病危险，提高人体免疫力[1]。番茄性味甘、酸、微寒，经常多吃能生津止渴、健胃消食。现代医学认为，番茄的酸性是由柠檬酸和苹果酸构成，它有促进唾液和胃液的分泌、帮助消化、增加胃内酵素的作用。中国已经成为番茄酱第一出口大国[2]，而番茄作为番茄酱生产的产体，销售量需求量都比较高。番茄种类丰富，既可以作为蔬菜来食用，又可以当作水果来食用，还可以加工成各种各样的番茄加工品。如番茄酱、果汁等。在很多科学领域，番茄也经常被作为重要的研究对象，如在细胞工程学、遗传学等都有重要的研究价值。

花青苷，又名花色素苷，是一种高活性的黄酮多酚类化合物[3]，多分布于植物的花、果实、种子、叶和其他器官的液泡中[4],赋予植物从粉红色到蓝紫色等不同的色泽。花色素苷含量的多少可以通过植物所呈现的色彩直接表现出来，当花青苷的含量低的时候呈现为粉红，植物中花青苷含量高的时候花的颜色从红色到深红至黑色[5]。花色素3，5，7位上的羟基可以与一个或多个单糖、二糖、三糖等通过糖苷键形成花青苷。由于与花青素合成花青苷的糖苷配基的种类、位置、数量的不同，形成的花青苷种类也不同[6]。花青苷是极性化合物，不溶于氯仿、正己烷、乙醚等非极性有机溶剂。很多植物的色素具有其颜色随pH值的变化而变化的特性，因此很多植物的色素可以作为酸碱指示剂。且一般这些植物色素在pH小于或等于3的酸性条件下稳定，pH小于7时为红色，pH在7-8时呈紫色，pH大于11时呈蓝色。