摘要：前期实验中，我们发现天然环肽化合物destruxin A5 具有改善硫酸葡聚糖钠（Dextran sulfate sodium, DSS）诱导的溃疡性结肠炎的作用。本课题在此基础上，进一步研究了 destruxin A5 治疗溃疡性结肠炎的细胞生物学机制：首先，我们探讨了destruxin A5的靶细胞是巨噬细胞还是T细胞；接着，我们研究了destruxin A5调控靶细胞的作用方式。本实验从两个方面入手，一方面通过检测destruxin A5对巨噬细胞炎症小体活化的调控情况，来判断 destruxin A5 对巨噬细胞炎症小体活化释放炎症因子的抑制效果；另一方面观察destruxin A5 对活化 T 细胞过度增殖和炎症因子过度释放的控制情况，来判断 destruxin A5 对活化 T 细胞的免疫抑制作用。以上实验可以明确 destruxin A5 的作用靶细胞，同时也可以阐明destruxin A5治疗小鼠溃疡性结肠炎的细胞生物学方式。最终我们发现destruxin A5能够抑制T细胞的过度活化增殖和炎症因子的过度产生。

该论文有图6幅，表1个，参考文献25篇。

关键词：destruxin A5  溃疡性结肠炎  巨噬细胞  T细胞  炎症因子

The inhibitory effects of destruxin A5 on T cell proliferation and the production of inflammatory factors

Abstract：In the previous experiments, we found that destruxin A5, a natural cyclopeptides, had the ameliorating effects on ulcerative colitis induced by dextran sulfate sodium (DSS). On the basis of this study, we further studied the cellular biological mechanism of destruxin A5 in the treatment of ulcerative colitis. Firstly, we investigated whether the target cell of destruxin A5 was macrophages or T-cell. Secondly, we studied the role of destruxin A5 in the regulation of its target cells. To study these two aspects, we designed further researches. On the one hand, the inhibitory effect of destruxin A5 on the release of inflammatory cytokines from macrophage was evaluated by detecting its role in suppression of the activation of NLRP3 inflammasome. On the other hand, the immunosuppressive effect of destruxin A5 on activated T cells was determined by assessing its inhibitory effect on the proliferation of T cells and the release of inflammatory factors. The experiments mentioned above could identify the target cell of destruxin A5, and elucidate the possible cellular biological manner of destruxin A5 in the treatment of ulcerative colitis in mice. Finally, we found that destruxin A5 could inhibit the proliferation of activated T cells and the production of inflammatory factors.

Key words: Destruxin A5   ulcerative colitis   macrophage   T cell   inflammatory factor

目录

摘要 Ⅰ

Abstract Ⅱ

目录 Ⅲ

图清单 Ⅳ

表清单 Ⅳ

1 绪论 1

2 实验材料与方法 2

2.1实验材料 2

2.2 实验方法 3

3 实验结果与分析 6

3.1 Destruxin A5对NLRP3炎症小体激活的调控作用 6

3.2 Destruxin A5对T细胞增殖和存活的影响 8

3.3 Destruxin A5对活化T细胞炎症因子产生的调控作用 10

4 讨论 13

参考文献 15

致谢 18

图清单

图序号 图名称 页码

图3-1 destruxin A5对蛋白pro-caspase1、cleaved-caspase1、NLRP3和ASC表达的影响 7

图3-2 destruxin A5对IL-18和IL-1β分泌的影响

8

图3-3 Destruxin A5对活化T细胞增殖的影响

9

图3-4 Destruxin A5对非活化T细胞存活的影响） 10

图3-5 Destruxin A5对活化T细胞产生的炎症因子抑制效果（mRNA分子水平） 11

图3-6 Destruxin A5对活化T细胞产生的炎症因子抑制效果（蛋白质水平） 12

表清单

表序号 表名称 页码

表2-1 PCR引物信息 6

1 绪论

溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis, UC）是炎症性肠病的主要形式之一，它是一种进行性和慢性炎症性肠病[1]。它的发病机理至今依然没有被完全阐明，现有的认识已经表明其背后的疾病机制是多方面的甚至是复杂的。在众多疾病机理中，人们已经清楚地发现：炎症性细胞因子在溃疡性结肠炎的发生和进展中扮演着十分重要的角色[2-7]。重要的是，溃疡性结肠炎患者的机体免疫系统通常是紊乱的。尤其值得关注的是那群失去控制的肠粘膜免疫细胞，这主要包括过度活化的T细胞和巨噬细胞，它们在应对失调的细菌、微生物相关物质和其他可能有害的外来物质时会大量释放炎症相关细胞因子，这将进一步加剧结肠的慢性炎症[2-7]。