现已证实，T细胞调控的炎症反应参与了硫酸葡聚糖钠（Dextran sulfate sodium, DSS）诱导小鼠结肠炎的发病过程[2, 3]。并且，DSS小鼠溃疡性结肠炎模型还能够用于研究肠道炎症过程中T细胞的发育情况[8]。有研究发现，由T细胞活化和增殖导致的适应性免疫应答在肠道炎症的持续发挥中起着重要作用[9]。过度活化和增殖的T细胞会大量分泌释放IL-2、IFN-γ、 IL-17和 IL-6等炎症因子[10, 11]。IL-2是T细胞的生长因子，抗原活化的T细胞能够大量分泌IL-2[11]；人们在多种溃疡性结肠炎动物模型的结肠组织中均发现了IFN-γ和IL-17a过度表达和积累的现象[3, 12]；Alex等人的研究证实，IL-6和IL-17在急性DSS结肠炎中显著升高，在慢性DSS结肠炎中IL-6和IFN-γ的表达增强[4]。以上研究共同说明了，过度活化的T细胞和其分泌的相关炎症因子是溃疡性结肠炎的重要病理因素。除T细胞外，活化的巨噬细胞也是导致和促进溃疡性结肠炎发生和进展的重要病理细胞。现已证实，NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3（NLRP3）炎症小体的活化而导致的IL-1β 和IL-18的过度分泌，是巨噬细胞参与DSS溃疡性结肠炎的重要机制[5, 6, 13]。依据这些现象我们可以推测：能够有效控制这些异常表达的炎症因子的治疗策略将可能是一种良好的治疗溃疡性结肠炎的办法。  

小分子化合物类药物一直是临床上治疗很多疾病的主力军。我们的实验发现，天然环肽化合物destruxin A5具有良好的抑制炎症因子产生的作用。然而药理学界有关环肽destruxin A5的研究结果至今十分稀少，通过文献搜索我们仅发现有这样的报道：destruxin A5能够通过选择性靶向PDGFR-β而阻断PDGF-B和PDGFR-β的结合，进而抑制PDGF-BB/PDGFR-ββ信号通路的活化达到缓解肝纤维化的作用[ 14]；destruxin A5具有杀虫作用，能够杀灭黑腹果蝇[ 15]。因此，我们无法从其他以往的研究中推测出destruxin A5免疫调控的可能机制。那么，destruxin A5抑制炎症因子产生的细胞生物学机制是什么呢?由于免疫细胞和溃疡性结肠炎的发生进展关系十分密切，且destruxin A5具有降低炎症因子表达的作用，所以我们有必要探讨destruxin A5的免疫调节作用。研究清楚这些问题将能够很好地解释destruxin A5的药理学作用，也将能阐明destruxin A5是通过何种细胞生物学作用方式来治疗溃疡性结肠炎的。

2 实验材料与方法

2.1实验材料

2.1.1实验试剂

纯度为99％的destruxin A5（分子量：605）溶于100% DMSO中配置成30 mM的母液待体外实验使用。胎牛血清(FBS, BI, Australia)、RPMI 1640 培养基（GIBCO, USA）、伴刀豆凝集A (Con A)、MTT从美国Sigma-Aldrich 公司购得；环孢素A（CsA）从湖北建元有限公司（武汉，中国）购买；IL-17a、IFN-γ、IL-2 和 IL-6 ELISA试剂盒购自达科为生物技术有限公司（北京，中国）；IL-18和IL-1βELISA试剂盒从上海源叶生物科技有限公司购得；针对RPS3、β-actin、ASC和GAPDH的抗体购自美国Santa Cruz 生物科技有限公司；针对NLRP3和caspase-1的抗体购自Epitomics (Burlingame, CA)；蛋白裂解液、DEPC水、二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）购自碧云天生物技术有限公司；蛋白预染Ladder(Thermo Scientific, USA)；PVDF 膜(Millipore, USA)购自日本和光纯药工业株式会社；RNAiso Reagent (Takara, Japan)；RT Buffer (TOYOBO, Japan)；RT ACE (TOYOBO, Japan)；OligodT (TransGen, Japan)；dNTP (TransGen, Japan)；RNase-free Water (Takara, Japan)。其余试剂均为国产分析纯。