摘要：选取五种传统香辛料通过乙醇热回流提取法提取其中有效成分，再通过建立乙酰胆碱酯酶抑制剂活性筛选模型，对有效成分乙酰胆碱酯酶抑制活性进行筛选。实验结果表明，五种传统香辛料中小茴香中抑制乙酰胆碱酯酶活性物质含量最高，抑制率可达66.7%。将小茴香作为主要研究对象经过乙醇溶剂回流法提取，并利用分光光度法在412nm处测定小茴香中乙酰胆碱酯酶抑制剂活性。通过单因素试验和正交试验优化提取工艺，确定小茴香中乙酰胆碱酯酶抑制剂活性成分的最佳提取条件为：75%乙醇作为提取溶剂、热回流提取温度75℃、提取时间90min、溶剂与样品比1:12.经过最佳组合工艺提取测定，小茴香中抑制乙酰胆碱酯酶活性物质抑制率为60.4%。

关键词：乙酰胆碱酯酶；乙酰胆碱酯酶抑制剂；传统香辛料；提取工艺

Extration Process of Active Components of Acetylcholinesterase Inhibitor in Traditional Spices

Abstract: Five kinds of traditional spices were extracted from the active ingredients extracted by ethanol hot reflux extraction, and then by screening the model of acetylcholinesterase inhibitor activity, the acetylcholinesterase inhibitory activity of the active ingredient was screened. The experimental results showed that the content of acetylcholinesterase active substances was the highest among the five traditional spices in fennel. The cumin as the main research object was extracted by ethanol solvent reflux method, and the activity of acetylcholinesterase inhibitor in cumin was determined by spectrophotometry at 412 nm. The optimum extraction conditions for the active components of acetylcholinesterase inhibitors in cumin were determined by single factor test and orthogonal test. The extraction conditions were as follows: 75% ethanol as extraction solvent, extraction temperature 75 ℃, heat reflux extraction time 90 min, solvent The ratio of solid spice powder to 1:12 was determined by the best combination technology. The inhibition rate of acetylcholinesterase active substance in fennel was 60.4%.

Key Words: Acetylcholinesterase; Acetylcholinesterase inhibitor; Traditional spices; Extraction process

目  录

1 引言 1

1.1 乙酰胆碱 1

1.1.1 乙酰胆碱酯酶概述 1

1.1.2 老年性痴呆症概述 1

1.2 乙酰胆碱酯酶抑制剂研究进展 2

1.3 天然植物有效成分提取方法概述 3

1.4 传统香辛料保健功能研究概况 4

1.5 本课题研究的目的及意义 5

2 实验材料和方法 6

2.1 实验材料 6

2.1.1 实验材料及试剂 6

2.1.2 实验仪器及设备 7

2.2 实验方法 7

2.2.1 乙酰胆碱酯酶活性测定方法模型的建立 7

2.2.2 香辛料酶活成分提取方法 8

2.2.3 香辛料中乙酰胆碱酯酶抑制剂的提取工艺 9

2.2.4 正交试验优化提取工艺 10

3 结果与讨论 10

3.1香辛料中酶活测定筛选模型建立的结果与分析 10

3.1.1 ATcH非酶水解产生的光吸收曲线 10

3.1.2 OD-t曲线 11

3.1.3 OD-酶活曲线 11

3.2 香辛料提取工艺结果与分析 12

3.2.1 香辛料不同提取方法对抑制率影响 12

3.2.2 五种香辛料乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选结果 12

3.2.3 不同提取条件的小茴香提取液对抑制率的影响 13

3.2.4 正交试验优化结果与分析 15

3.2.5 验证实验结果 15

4 结论与展望 16

致   谢 17

参考文献 18

1 引言

1.1 乙酰胆碱

乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）是一种神经递质，在组织内可以迅速被胆碱酯酶破坏。在神经细胞中，乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶(胆碱乙酰化酶)的催化作用下合成的。由于该酶存在于胞浆中，因此乙酰胆碱在胞浆中合成，合成后由小泡摄取并贮存起来。乙酰胆碱的缺失是导致老年痴呆症（AD）疾病的关键原因。