1.4 试验方法：点滴法

1.4.1 预备实验

选取德国小蠊雄性成虫30头，随机分成3组，每组10头。将试虫用CO2麻醉后，仰卧排列在培养皿内，用手动微量点滴器依次按低至高浓度（0.16mg/L、0.80mg/L、4.0mg/L、20.0mg/L、100.0mg/L）的fluralaner将1.0μL药液点滴在试虫第2、第3 对足基节间的腹板上，然后转入清洁的容器中，用混合饲料和浸水棉球正常喂养。设丙酮做空白对照，于24h、48h、72h 、96h、120h后检查死亡率。以虫体仰翻、不能爬行为死亡标准。

1.4.2 正式实验

以丙酮为溶剂配制一定浓度母液，再按等比或等差配制5-7个浓度级备用。将试虫用CO2麻醉后，仰卧排列在培养皿内，由低至高浓度依次用手动微量点滴器将1.0μL药液点滴在试虫第2、第3 对足基节间的腹板上。每个浓度级各滴10只，重复3次。以丙酮作为空白对照。点药后置于内含饲料和含水棉花的一次性塑料杯中正常饲养，杯口用单层纱布封住，以防逃逸。于24h、48h、72h 、96h、120h后检查死亡率。以虫体仰翻、不能爬行为死亡标准。每种药剂均作3次以上重复[13]。

1.5 统计分析方法

利用POLO Plus（LeOra Software 2003）、SPSS 17.0等软件，将浓度值转换成对数，各组死亡率转换成几率值；从浓度对数和几率值的关系，用最小二乘法求出毒力回归方程y=a+bx和卡方值等；用死亡率为50%的概率单位y=5代入回归方程y=a+bx，求得LC50、LC50的95%置信限、LD50、LD50的95%置信限。

2 结果与分析

2.1 Fluralaner对德国小蠊的室内毒力测定

用fluralaner对德国小蠊进行室内毒力测定，试验24h、48h、72h、96h、120h的LC50分别为11.7368mg/L、7.5617mg/L、6.5599mg/L、4.5890mg/L、4.4918mg/L（表1-1），对应LD50值分别为0.0117μg /只、0.0076μg /只、0.0066μg /只、0.0046μg /只、0.0045μg /只（表2-2）。由此可见fluralaner对德国小蠊的毒力作用在0-96h内随时间增加而增大，而96h后毒力作用趋于稳定。

表1 德国小蠊对fluralaner的敏感性

Table-1 The sensitivity of B. germanica to fluralaner  

表1-1Table-1-1时间（Time）

回归方程（LC-P line）

LC50 mg/L（95% FL）

卡方值（Chi-square）

24h y=3.0918+1.7841x 11.7368（8.6055,16.0075）   9.1515

48h y=2.7736+2.5340x     7.5617（6.4775, 8.8273） 8.6560

72h   y=1.5977+4.1650x     6.5599（6.0478, 7.1153） 8.2182

96h y=2.9613+3.0809x     4.5890（4.2045, 5.0086） 6.5586

120h y=2.4367+3.9289x     4.4918（4.1084, 4.9110） 4.3706

表1-2Table-1-2

时间（Time） 回归方程（LD-P line） LD50 μg /只（95% FL） 卡方值（Chi-square）

24h y=8.4442+1.7841x    0.0117（0.0086, 0.0160）   9.1515

48h y=10.3756+2.5340x 0.0076（0.0065, 0.0088） 8.6560

72h   y=14.0925+4.1650x 0.0066（0.0060, 0.0071） 8.2182

96h y=12.2040+3.0809x    0.0046（0.0042, 0.0050） 6.5586

120h y=14.2233+3.9289x    0.0045（0.0041, 0.0049） 4.3706

2.2 常用杀虫剂对德国小蠊的室内毒力测定

表2 德国小蠊对六种常用药剂的敏感性

Table-2 The sensitivity of B. germanica to six kinds of commonly used insecticides

杀虫剂 测试浓度（mg/L） 死亡率（%）（Death rate） 差异（%）

(Insecticides) （Concentration） 1 2 3 平均值（Average value） （Difference）

丁烯氟虫腈  5.0   70.00 86.67 83.33 80.00 28.89*

氟虫腈  5.0 66.67 83.33 90.00 80.00 28.89*

敌敌畏  5.0 63.33 63.33 50.00 58.89 7.78

fluralaner（CK）  5.0 36.67 66.67 50.00 51.11 -

高效氯氢菊酯  5.0 43.33 43.33 40.00 42.22 -8.89

残杀威  5.0 33.33 20.00 10.00 21.11 -30.00**

注：*表示显著差异，**表示达到极显著差异。