摘要：酵母菌通常与食物相挂钩，然而酵母菌之中其实含有非常有效的抗氧化成分和美白效果，可以将其运用在化妆品之中。本实验以酒糟为来源，培养并筛选其中所含的酵母菌，以DPPH清除率和酪氨酸酶为指标，筛选到一株抗氧化性高，且美白度好的优良菌株5-19，经23s DNA鉴定为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae strain）。通过DPPH自由基清除实验，酪氨酸酶测定，细胞的破壁，经过初筛和复筛，得到抗氧化性能最佳，美白功效最好的菌株5-19，破壁之前的DPPH清除率为62.2%，美白度为8.2%，破壁之后的DPPH清除率为70%，美白度为20.1%。

关键词：酵母菌、菌种鉴定、DPPH清除率、酪氨酸酶

Screening and Identification of Yeasts with Antioxidant and Whitening Effects in Distiller's Grain

Abstract：Yeast is usually linked to food, but yeast actually contains very effective antioxidants and whitening effects that can be used in cosmetics. In this experiment, Distiller's grains was used as the source, and the yeast contained therein was cultured and screened. DPPH clearance and tyrosinase were used as indexes to screen a strain 5-19 with high anti-oxidation and good whiteness. The 23s DNA was identified as Saccharomyces cerevisiae strain. Through the DPPH free radical scavenging assay, tyrosinase assay, and cell wall disruption, after screening and rescreening, the strain 5-19 with the best antioxidant performance and the best whitening effect was obtained, and the DPPH clearance rate before disruption was 62.2%, whitening degree was 8.2%, DPPH clearance rate after breaking was 70%, and whiteness was 20.1%.

Keywords: Yeast, DNA identification, DPPH clearance rate, Tyrosinase

目录

1绪论 3

1.1 酒糟概述 3

1.2 酵母菌概述与作用 3

1.2.1 酵母菌概述 3

1.2.2 酵母菌的主要成分 4

1.2.3 酵母菌的功效 4

1.2.4 酵母菌的抗氧化成分 5

1.3 抗氧化菌的筛选 5

1.4 酪氨酸酶的概述 6

1.5 本课题的研究意义及主要研究内容 8

1.5.1 课题的研究意义 8

1.5.2 课题研究的内容 8

2 材料与方法 8

2.1 分离样品 8

2.2 试剂及其配制方法 9

2.3 仪器与设备 10

2.4 实验方法 11

2.4.1 酵母菌的分离 11

2.4.2 酵母菌抗氧化能力的测定 11

2.4.3 酪氨酸酶的测定 12

2.4.4 细胞的破壁 12

2.4.5 菌株鉴定 13

3结果与分析 13

3.1 酵母菌的分离 13

3.2 酵母菌的初筛 14

3.2.1 菌株DPPH自由基清除能力 14

3.2.2 酵母菌的美白度筛选 16

3.3 酵母菌的复筛 19

3.4 菌株的鉴定 21

4结论与展望 23

4.1 结论 23

4.2 展望 23

致谢 24

参考文献 25

1绪论

1.1 酒糟概述

酒糟或称酒药、酒饼、酒糟、小曲、白药，是以籼米粉、辣蓼草等，为主要原料所制作而成，兼具有糖化和发酵的双边作用，是我国独特的酿酒用糖化发酵剂[1]。我国酒糟资源丰富,酒糟中不但含有各种蛋白质和氨基酸,还含有丰富的糖类、脂肪、维生素及无机元素等,具有相当的利用价值[2]。在我国的南方等地区，以酒糟为原料，有着多种多样的发酵制品，例如各种风味独特的黄酒（其中以绍兴黄酒最为出名），宁波的酒糟，小曲白酒，更有苏州以甜味道为主的苏州甜酒糟，在我们的上海，还有崇明“八二曲”也较为有名[3]。在数百年的历史长河之中，我国人民的智慧使得我国的酿酒艺术不断发展，由于是用了陈药接种，经历了一代又一代人的精心培育和筛选，最终留下来的是极为优秀的发酵菌。酒糟是酒精工业和酿酒工业的废弃物[4]，是酒醅发酵完后再经蒸馏出酒后残留的混合固形物,是酒行业最大的副产物[5]。如何合理的利用酒糟，就成为了我们本世纪一个值得探讨的话题，合理利用酒糟，既可以对于工业有着很大的帮助，也可以对于资源的合理利用做出贡献。