化疗药物多柔比星对小鼠卵巢颗粒细胞的毒性检测(3)

(1)CCK-8试剂法检测确定多柔比星在体外培养的小鼠颗粒细胞上的半数抑制浓度(IC50) CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8,CCK-8),一种广泛应用于快速测定细胞


(1)CCK-8试剂法检测确定多柔比星在体外培养的小鼠颗粒细胞上的半数抑制浓度(IC50)

CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8,CCK-8),一种广泛应用于快速测定细胞增殖和细胞毒性的试剂盒,检测原理是基于其含有的WST-8化合物,检测结果灵敏度很高。试剂盒中含有的WST-8化合物在有电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯存在时,能够被细胞内线粒体中的脱氢酶还原为具有良好水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan(参考图1.1),生成的甲瓒产物Formazan数量与所检测的体系中活细胞的数目成正线性相关。生成的橙黄色甲瓒产物Formazan的含量可以用酶标仪在450nm波长处测定其OD值,从而间接体现出检测体系的活细胞数目[22]。所以,利用CCK-8的这一特性可直接进行细胞增殖快慢的研究和药物对细胞的毒性作用研究,其细胞数量越多则添加CCK-8试剂作用后的产物颜色越深,表明细胞增殖越多越快;细胞所受到的药物毒性越大,细胞生长受到抑制,细胞数量也就相对较少,其产物的颜色越浅。