摘要：母猪繁殖性能对于养猪业来说至关重要。妊娠母猪背膘过厚往往会导致繁殖性能的下降与胎盘功能的紊乱，但其影响机制的研究却鲜有报道。脂肪毒性即由脂肪异位沉积引起的组织细胞氧化应激、炎症反应和细胞凋亡，进而损伤组织细胞的结构和功能［1］。研究表明母体妊娠肥胖引起的繁殖力下降与胎盘脂肪毒性的发生有关，虽然在人、大鼠和山羊中均证实妊娠肥胖可引起胎盘脂肪毒性的发生，但在猪高膘妊娠是否同样会引起胎盘脂毒性的发生还未见报道［2］.因此，本文拟研究母猪高膘妊娠对胎盘绒毛细胞凋亡的影响，通过TUNEL荧光染色检测，免疫组化染色检测，Western blot 检测凋亡蛋白表达水平等方法，研究母猪高膘妊娠对胎盘滋养层细胞凋亡发生的影响，发现脂肪大量沉积在胎盘，会造成胎盘滋养层细胞的凋亡。

关键词：背膘厚度；细胞凋亡；脂肪毒性；脂肪异位沉积；

Effect of sow 's high - fat pregnancy on apoptosis of placental trophoblast cells

Abstract：Sow reproductive performance is critical to the pig industry. Pregnant sows have a tendency to decline in reproductive performance and disorder of placental function, but the mechanism of its impact is rarely reported. Lipid toxicity is caused by lipid ectopic deposition of tissue cells oxidative stress, inflammatory response and apoptosis, and thus damage the structure and function of tissue cells [1]. Studies have shown that maternal fecundity caused by maternal pregnancy obesity is associated with the occurrence of placental lipotoxicity.Although both in humans, rats and goats have confirmed that pregnancy obesity can cause placental lipotoxicity, but whether high-fat pregnancy in pigs also cause placenta The occurrence of lipid toxicity has not been reported [2] .Therefore, this paper intends to study the effect of sow high fat pregnancy on placental villus cell apoptosis, by TUNEL fluorescence staining, immunohistochemical staining, Western blot detection of apoptotic protein expression Level and other methods to study the sow high fat pregnancy on placental trophoblast cell apoptosis and found that a large number of fat deposition in the placenta, causing placental trophoblast cell apoptosis.

Key words: backfat thickness; apoptosis; lipotoxicity; fat ectopic deposition;

目  录

摘要1

关键词1

Abstract1

Key words1

引言1

1材料与方法1

1.1材料 1

1.1.1试验动物和分组 1

1.1.2饲养管理 2

1.1.3母猪背膘和分组 2

1.1.4实验材料的准备2

1.2实验过程 2

1.2.1TUNEL荧光染色检测2

1.2.2免疫组化染色检测 2

1.2.3Western blot 检测凋亡蛋白表达水平  2

2.结果与分析  3

2.1TUNEL荧光染色检测结果与分析3

2.2免疫组化染色检测结果与分析 4

2.3Western blot 检测凋亡蛋白结果与分析4

3.总结与讨论5

致谢6

参考文献6

母猪高膘妊娠对胎盘滋养层细胞凋亡发生的影响

引言；膘情与母猪繁殖性能密切相关。膘情是母猪机体体况的一个重要指标，它反映的是母猪在不同生理阶段的营养状况和体能储备妊娠期高能量摄入会导致膘情过肥，影响子宫壁血液循环并导致子宫壁血液循环障碍，可能因为营养过剩而造成妊娠母猪过肥，从而造成胎盘滋养层细胞的凋亡。这可能与母猪在妊娠过程中的胎盘脂肪异位沉积有关，脂肪可以沉积在肝脏，形成脂肪肝，沉积在骨骼肌，胰腺心肌，同样可以沉积在胎盘，脂肪大量沉积在胎盘，从而导致胎盘细胞的氧化应激反应，并造成胎盘细胞的凋亡。这可能与胎盘细胞在面对大量的脂肪异位沉积所导致的氧化应激反应和炎症反应有关［3］。

 当细胞凋亡时线粒体膜电位的改变，会导致线粒体膜的通透性改变，使Cy- C释放至细胞质中，导致Caspase3活化，造成一连串凋亡反应。细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA，形成180-200bp的DNA 片段。基因组DNA断裂时，暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素  标记的dUTP 或者Brdu，从而可以通过荧光显微镜进行检测。