在现在这个化工业飞速发展的时代,离子液体作为一种化学品存在着潜在的毒性,且不同离子液体混合后呈现出的毒性不同。Jastorll[6]等用水生浮游生物藻
在现在这个化工业飞速发展的时代,离子液体作为一种化学品存在着潜在的毒性,且不同离子液体混合后呈现出的毒性不同。Jastorll[6]等用水生浮游生物藻和一些陆生草本植物为试验对象,对咪唑类ILs的毒性进行了研究实验。实验表明,暴露在咪唑类ILs中的这两种受试植物的生长都受到了一定抑制,并且随着烷基取代链长度越长,它存在的毒性也越大。而自然环境中的生物在接触离子液体时多少会受其毒性影响[7]。本实验将使用秀丽线虫作为研究生物,以emimCl、emimBr及其不同比例混合离子液体为例,探究离子液体对秀丽线虫的致死率。从而探究离子液体其对生物的影响。
1.2 EmimCl、EmimBr的概况
1.2.1 EmimCl的应用
离子液体在食品物料的分离提取、分析及改性中的作用越来越得到重视和利用。Emimcl能够处理提高豆渣中水溶性膳食纤维。因为纤维素在离子液体中能够解聚而促溶,以富含水不溶性膳食纤维的食物残渣豆渣为原料,依据Box Behnken Design(BBD)设计的响应曲面实验,考察处理温度、处理时间、料液比,以豆渣中水溶性膳食纤维的含量为响应值,优化了氯化1-乙基-3-甲基咪唑(EMImCl)离子液体处理的工艺参数。结果表明,当处理温度为76.4℃、处理时间为12h、料液比为1∶15g/m L时,处理效果最佳,豆渣中水溶性膳食纤维的含量可提高到11.6g/100g,远高于原始豆渣中的6.0g/100g。方差分析表明,处理温度和处理时间对SDF的含量影响极显著,而料液比的影响不显著。[8]
1.2.2 EmimBr的概况
本实验中所使用的EmimBr是一种亲水性较强的离子液体,回收率高,能方便循环使用。离子液体几乎不挥发,不太容易对环境造成污染,是环境友好型溶剂。[9]
1.3毒理学模式生物秀丽隐杆线虫
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C. elegans)是一种可以自主独立生存的生物,其对于人体和环境无毒无害 。其体型不大,成虫仅有1.5mm长,为雌雄同体(hermaphrodites),雄性个体仅占群体的0.2%,食物来源是大肠杆菌,易于培养[10]。可自体受精或者双性生殖;在20℃下一个生命周期约为3天半,平均繁殖力为300-350个;但若与雄虫交配,则可繁殖超过1400个后代个体。自1965年起,科学家Sydney Brenner操纵线虫作为分子生物学和发育生物学钻研范畴的模式生物。
秀丽隐杆线虫基本的生命周期如下:秀丽隐杆线虫由雌雄同体产下卵。卵在孵化后,会经历四个幼虫期(L1-L4)。当族群拥挤或食物不足时,秀丽隐杆线虫会进入另一种幼虫期,叫做dauer幼虫。Dauer能对抗逆境,而且不会老化[11]。雌雄同体在L4期生产精子、并在成虫期产卵。雄性能使雌雄同体受精;雌雄同体会优先选择雄性的精子。秀丽隐杆线虫在实验室中20°C的情况下,平均寿命约为二、三周,而发育时间只须几天。
1.4本文的研究目的、意义及内容
本实验以秀丽线虫作为实验对象,以离子液体一咪唑氯及一咪唑溴作为实验离子液体。由于在现实生活中,物质大多以混合物形式错在。希望通过实验初步探究出秀丽线虫暴露在这两种离子液体及其混合离子液体获得1-乙基咪唑离子液体的急性毒性半数致死效应浓度及其置信区间。
第二章 材料与方法
2.1 实验材料与设备
2.1.1 实验材料
离子液体emimCl、emimBr胰蛋白胨,酵母浸膏,NaCl,NaOH,琼脂粉,MgSO4,CaCl2,无菌蒸馏水,5mg/mol胆固醇乙酶溶液,无水乙醇,秀丽隐杆线虫,大肠杆菌,K溶液,
2.1.2 实验设备
显微镜,培养皿,烧杯,烧瓶,96孔板,高压灭菌锅
2.2 实验方法
1)配置LB培养基(Luria Bertani)→E.coli<尿嘧啶缺陷型>
取容量为1L的锥形瓶,用电子天平称取胰蛋白胨10g,酵母浸膏5g,氯化钠10g加入锥形瓶。取1M的氢氧化钠4g加100ml蒸馏水调PH至7.0。加入1L蒸馏水。用牛皮纸和橡皮筋封住锥形瓶口。放入高压蒸汽灭菌锅,调至121摄氏度,0.105MPa灭菌20分钟。灭菌完成后等待冷却至室温,分装至六个容量为250ml的小锥形瓶中。