1.2.1 超声提取法

超声波提取（Ultrasonic extraction）常用的物理破坏方法，超声波作用在其中，增强中草药的活性物质的提取并且提高萃取率。超声提取的机制包括了通过细胞机体溶解溶剂和洗去细胞内核，这个过程产生了可观的的气蚀和微流。当超声波振动发出、传送巨大的能量时，会使介质颗粒以较大的速率和加速度进入振动状态，使介质结构发生变化，促使活性成分进入溶剂[9]，同时，液体中也可能出现空化现象，即在相当大的破坏应力作用下液体中形成空化气泡的现象。一旦超声辐射表面上的强度在达到0.3W/cm时，在水介质中，就会诱发空化效应。超声提取法是一种创新的而且不需要热能的方法，它可以有效地提高生物混合。它不仅避免了产品的损失，也提高了产品的营养成分，促进了生物活性，也减少了处理时间以更小的能耗。如果含有植物活性成分的混合溶液被浸出并在两个阶段（沉淀和浸出）用超声波处理之前和之后，其中的大分子可以快速有效地聚合成大颗粒。并且促进沉淀更加完整，一般只需要20-30分钟，即可完成提取，这是含有悬浮颗粒的超声波气体在短时间内聚集成较大颗粒沉淀。

1.2.2 超临界CO2萃取

超临界CO2萃取法将750g薤白样品加入5L萃取釜中,在25MPa萃取压力、40℃萃取温度及25Lh、CO2流量条件下,萃取120min。收集分离器中得到的提取物样品,称其质量,计算萃取率,待GC-MS分析。

影响萃取率的主要因素有萃取温度、压力、流体流量、萃取时间、药材粒度等,前3个因素影响较大。通过正交实验对超临界CO2萃取薤白提取物的工艺参数进行优化,3个影响因素各取4水平,选L16正交试验表安排试验,由因素水平可知,薤白最佳萃取工艺条件为:萃取压力25MPa、萃取温度40℃、CO2流量25Lh。萃取压力、温度、CO2流量3个因素的离差值分别为1.35,2.17和0.94,这表明萃取温度和萃取压力对提取物萃取率的影 响大大超过了CO2流量的影响,影响程度为:温度>压力>CO2流量,其中萃取温度对提取物萃取率的影响最大。

采用超临界CO2萃取技术,有效成分不易被破坏,特别是低沸点挥发性物质损失少, 高沸点物质更易被萃出,收率较高。通过正交实验得到了超临界CO2萃取薤白中提取物的最佳萃取条件,压力25MPa、温度40℃、CO2流量25 L h、萃取时间120 min ,收率为4.41,为水蒸气馏法提取率(1.72)2.8倍。通GC-MS对两种方法得到的提取物成分的分析,确定了薤白提取物中主要成分为含硫化合物,及其质量分数。超临界CO2萃取法较水蒸气蒸馏法的提取时间大大缩短,萃取温度降低,而萃取率显著提高。

1.2.3 水溶液提取法

称取250g薤白粉末样品于2000 mL圆底烧瓶中,加入1200mL水,回流8h,用乙醚收集,并蒸出乙醚,称其质量,计算萃取率,待GC-MS分析用。

文献报道薤白有效成份为大蒜氨酸、甲基大蒜氨酸、大蒜糖、亚油酸、油酸、棕榈酸、二烯丙基硫等。有关薤白提取物的提取和测定均已有文献报道,并且已制成胶丸用于临床试验,效果较好。关于其水溶物的研究较少。我们在水提过程中,发现大量泡沫,且持久不消失,提示含有皂甙成份,提取物呈黄色透明。关于HO·的检测方法有电子自旋共振波谱法(ESR)、高效液相色谱法(HPL )、荧光法等。由于HO·是反应性很强的自由基,存在寿命极短,故需要加入各种捕获剂。本实验用 Fenton反应产生羟自由基,并在该反应体系中加入苯甲酸,生成的羟自由基被苯甲酸捕获,生成具有荧光特性的羟基苯甲酸,两种薤白水提物均能抑制羟基苯甲酸的形成,提示薤白具有清除HO·的作用。薤白药源丰富,具有开发价值。H2O2可对细胞产生损害作用,在氧化损伤严重情况下,细胞骨架和细胞膜的破坏可引起细胞死亡或破裂。平阴产薤白水提取物对H2O2引起的溶血反应具有一定抑制作用,但高密产薤白无此作用。出现上述实验结果的可能的原因是:一是薤白本身含少量皂甙,而皂甙本身具有溶血作用；二是水提物有底色,对测定产生一定干扰。