抗菌肽具有广泛的生物学效应,因此其在医学上具有很好的潜在应用市场,不但在人类医学上得到应用,在水产养殖行业发展中的应用前景也越加广阔。将
抗菌肽具有广泛的生物学效应,因此其在医学上具有很好的潜在应用市场,不但在人类医学上得到应用,在水产养殖行业发展中的应用前景也越加广阔。将抗菌肽应用于水产品养殖中能够减少抗生素类药物使用所带来的残留和耐药性等问题,并且能够提高水产动物的抗病能力[4][5],将抗菌肽用作饲料添加剂或制备成复合药物用于疾病防治具有广阔的发展空间。然而将抗菌肽应用于水产品养殖方面的研究时间并不长,目前还处于发展阶段,距离技术成熟,将抗菌肽大规模应用于水产动物养殖还需要一系列问题需要解决[6]。
芬母多肽是抗菌肽的一种,具有亲水亲脂的特性,而且具有良好的热稳定性,进入人体消化系统或血液后会在短时间内分解为氨基酸,具有广谱抗菌性的同时,对某些带包膜病毒也有杀伤效果,甚至可杀伤肿瘤细胞,由于作用于微生物细胞膜,所以很难产生耐药性,对高等动物健康细胞几乎不产生毒害作用,不会发生过敏反应,可以安全的与人体皮肤和粘膜接触,安全性很好。芬母多肽用于细菌细胞膜,使细胞膜的通透性改变,进而使细菌裂解死亡,因为原核生物细胞膜和真核生物的细胞膜成分、结构不同,真核细胞膜中大量胆固醇的存在使膜结构趋于稳定,所以芬母多肽在作用于细胞时,只对原核生物细胞与真核生物病变细胞有杀灭作用,对正常的真核生物细胞不起作用。随着研究的深入,芬母多肽在人类现实生活中中已经应用于细菌所引发的各类口腔疾病及炎症的治疗、健康口腔日常的清洁与护理、长期卧床、住院病人、手术前后、糖尿病、婴幼儿皮肤瘙痒处的护理与清洁。
罗氏沼虾属于大型淡水虾,它具有肉质营养成份含量高、生长周期快、食性广、以及养殖周期较短等方面的优点。罗氏沼虾原产于东南亚,我国1976年引进此虾,目前罗氏沼虾的养殖行业已经分布中国多个省市,为养殖户取得了显著的经济效益。罗氏沼虾的生命活动周期分为四个发育生长阶段,分别为受精卵阶段、幼体阶段、幼虾阶段及成虾阶段,本次试验在幼体阶段进行。幼体阶段最为复杂,在发育过程中,罗氏沼虾幼体需要经过11次的蜕皮和生理与外观形态的改变,才能最终发育成幼虾,这个变化的过程称为变态,一般情况下,养殖的幼体发育成幼虾的时间为20-26天。[7] [8]本次试验所用罗氏沼虾幼体由元鑫水产品公司提供,幼体养殖到第26天基本达到最高的变态率随即进行售卖,该养殖场3-4月罗氏沼虾幼体变态率约为60%。幼体的养殖水体为人工海水,盐度为4.5-5.5ppm。罗氏沼虾幼体20天前在人工海水中养殖,水体温度保持在33摄氏度,并且进行不间断供氧[9],保证水体中充足含氧量,每天排污两次,每隔48h换去养殖塘中一半人工海水。20天后将已经完成变态的虾苗转移至淡水养殖,未完成变态的幼体继续在人工海水中养殖。[10]
本实验主要测定芬母多肽对水产品养殖过程中常见弧菌的杀菌效果以及对梅氏弧菌、副溶血弧菌、拟态弧菌和嗜水气单胞菌的最小杀菌浓度以及探究芬母多肽在罗氏沼虾幼体养殖过程中的实际应用。
1 材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验用品
EP管
一次性塑料培养皿
96孔板
1.1.2实验仪器
超净台
高压灭菌锅
摇床
培养箱
1.1.3实验试剂
LB液体培养基:蛋白胨、酵母粉、氯化钠、
LB固体培养基:蛋白胨、酵母粉、氯化钠、琼脂粉
双倍营养肉汤培养基:胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠
中和液:卵磷脂、无水乙醇、吐温
1.2试验方法
1.2.1杀菌活性检测