配置LB液体培养基和LB固体培养基：根据样品数量，算得实验所需要配置的培养基体积。LB液体培养基：在950 ml去离子水中加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g氯化钠，摇动锥形瓶直至溶质溶解，用去离子水定容至1L。培养基封口，并贴好标签、置于高压灭菌锅内121℃灭菌15min。LB固体培养基：在950 ml去离子水中加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g氯化钠、15g琼脂粉，摇动锥形瓶直至溶质溶解，用去离子水定容至1L。培养基封口，并贴好标签、置于高压灭菌锅内121℃灭菌15min。灭菌后放入55℃温水浴中冷却，在超净台中倾注平板并晾干。

   摇菌：分别取3mLLB液体培养基于两个试管中，用10ul枪头在画好的菌板中取单个生长的菌，倾斜试管，将菌吹到至试管中，盖上盖子，标签，放置摇床，37℃摇至对数生长期，使其OD600nm=0.6-0.8。

   调菌：取上述对数生长期的细菌，用无菌水将其稀释为不同OD值的菌液，分别取不同OD值的菌液100ul加入到900ul的无菌水中，将其梯度稀释10倍、100倍，分别取500ul于无菌培养皿，倒入固体培养基，待培养基晾干后放入恒温培养箱中倒扣培养，37℃培养12h，平行两组实验，培养完成后进行菌落计数，使菌液的作用浓度在1×104-9×104CFU/ml。

   配制不同浓度梯度的芬母多肽，取1mL样品溶液于1号1.5mL EP管中，加入100uL配置好的菌悬液，静置10min；取1号管样品100uL于2号EP管，加900uL中和液，再将2号样品用无菌水梯度稀释10倍、100倍。

   将上述稀释10倍和100倍的样品，分别取100uL于放置了5-6颗灭菌玻璃珠的LB固体培养基中，均匀摇晃培养皿，使培养皿内的玻璃珠将液体均匀的铺在培养基上，直到培养基上无水痕，每组各设置一个平行实验，将培养皿放入恒温培养箱中倒扣培养，37℃培养12h，培养完成后菌落计数，计算杀菌率。杀菌率=（对照样品平均菌落数-被试样品平均菌落数）/对照样品平均菌落数×100%

1.2.2最小抑菌浓度检测

   配制LB液体培养基、LB固体培养基和双倍肉汤培养基：根据样品数量，算得实验所需要配置的培养基体积。LB液体培养基：在950 ml去离子水中加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g氯化钠，摇动锥形瓶直至溶质溶解，用去离子水定容至1L。培养基封口，并贴好标签、置于高压灭菌锅内121℃灭菌15min。LB固体培养基：在950 ml去离子水中加入10g蛋白胨、5g酵母粉、5g琼脂粉、10g氯化钠，摇动锥形瓶直至溶质溶解，用去离子水定容至1L。培养基封口，并贴好标签、放置到高压灭菌锅内121℃灭菌15min。灭菌后放入55℃温水浴中冷却，在超净台中倾注平板并晾干。双倍肉汤培养基：根据样品数量，计算需配置的培养基体积。双倍肉汤培养基：在950 ml去离子水中加入20g蛋白胨、10g酵母提取物、20g氯化钠，摇动容器直至溶质溶解，用去离子水定容至1L。培养基封口，标签、置于高压灭菌锅内121℃灭菌15min。

   摇菌：分别取3mLLB液体培养基于两个试管中，用10ul枪头在画好的菌板中取单个生长的菌，倾斜试管，将菌吹到至试管中，盖上盖子，标签，放置摇床，37℃摇至对数生长期。

   调菌：取上述对数生长期的细菌，用无菌水将其稀释为不同OD值的菌液，分别取不同OD值的菌液100ul加入到900ul的无菌水中，将其梯度稀释10倍、100倍，分别取500ul于无菌培养皿，倒入固体培养基，待培养基晾干后放入恒温培养箱中倒扣培养，37℃培养12h，平型两组实验，培养完成后进行菌落计数，使菌液的作用浓度在5×105-5×106CFU/ml。

配置高浓度芬母多肽溶液（2mg/ml）并用超纯水倍比稀释至不同浓度。取样液100uL于无菌96孔板，然后加入100uL双倍浓度营养肉汤培养基，然后每孔加入10uL菌液，每个样品每个浓度作三组平行实验。以同样方法接入于不含抗菌剂的营养肉汤中作阳性对照，100ul无菌水接入营养肉汤中作阴性对照.